癌促進型RNA結合蛋白質の分子機構に着目した新規食道癌治療標的の探索

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K08949
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 増田 清士 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(医学系), 准教授 (00457318)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: RNA結合蛋白質 / 食道がん / 転写後調節機構

研究実績の概要

前年度までの検討から、食道扁平上皮癌（ESCC）で癌促進型RBPとして機能するTIA1aが、1）発現異常は転写誘導因子の発現異常や機能異常によること、2）自身のリン酸化修飾によって細胞内局在が制御されることを見いだした。本年度は、TIA1a発現異常の背景にある分子機序とTIA1aの癌促進機能に対する効果的な介入法を明らかにするため、以下の研究を行った。1）抗TIA1抗体で免疫沈降を行い、TIA1と結合する蛋白質を質量分析で同定した。TIA1のリン酸化修飾に関与するキナーゼを同定することはできなかったが、複数のRBPを同定した。また、リン酸化部位のアミノ酸配列より、リン酸化キナーゼを予測したところ、複数のキナーゼが同定された。これらに対する特異的阻害剤やsiRNAを用いて検討した結果、細胞質TIA1aが核内に移行し、細胞増殖が抑制された。以上の結果から、同定したキナーゼを治療標的とすることで、TIA1aのがん特異的機能を抑制する可能性が示唆された。2）前年度に同定したTIA1のリン酸化修飾部位を含む細胞膜透過型合成ペプチドを設計し、TIA1a発現細胞に投与したところ、細胞質TIA1aを核内に移行することができた。しかしこの効果は限定的であったため、さらなる検討が必要と考える。
3）初年度に同定したTIA1標的mRNAに関して、ビオチン化したRNAプローブを作成し、１）で同定したRBP及びTIA1の結合領域をビオチンプルダウン法で決定したところ、複数の癌関連miRNA（miR-200c、miR-19など）の結合配列と一致したことから、TIA1はこれらのRBPやmiRNAと相互作用することで標的mRNAの発現を調節していることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] KH-type splicing regulatory protein is involved in esophageal squamous cell carcinoma progression (2017)
  • 著者名/発表者名: Fujita Y, Masuda K, Hamada J, Shoda K, Naruto T, Hamada S, Miyakami Y, Kohmoto T, Watanabe M, Takahashi R, Tange S, Saito M, Kudo Y, Fujiwara H, Ichikawa D, Tangoku A, Otsuji E, Imoto I
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 8 ページ: 101130-101145
  • DOI: 10.18632/oncotarget.20926
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Prevalence of pathogenic germline variants detected by multigene sequencing in unselected Japanese patients with ovarian cancer (2017)
  • 著者名/発表者名: Hirasawa A, Imoto I, Naruto T, Akahane T, Yamagami W, Nomura H, Masuda K, Susumu N, Tsuda H, Aoki D
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 8 ページ: 112258-112267
  • DOI: 10.18632/oncotarget.22733
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Frequent silencing of RASSF1A by DNA methylation in thymic neuroendocrine tumours (2017)
  • 著者名/発表者名: Kajiura K, Takizawa H, Morimoto Y, Masuda K, Tsuboi M, Kishibuchi R, Wusiman N, Sawada T, Kawakita N, Toba H, Yoshida M, Kawakami Y, Naruto T, Imoto I, Tangoku A, Kondo K
  • 雑誌名: Lung Cancer 巻: 111 ページ: 116-123
  • DOI: 10.1016/j.lungcan.2017.05.019
  • 査読あり
• [雑誌論文] Construction of a combinatorial pipeline using two somatic variant calling methods for whole exome sequence data of gastric cancer (2017)
  • 著者名/発表者名: Kohmoto T, Masuda K, Naruto T, Tange S, Shoda K, Hamada J, Saito M, Ichikawa D, Tajima A, Otsuji E, Imoto I
  • 雑誌名: J Med Invest 巻: 64 ページ: 233-240
  • DOI: 10.2152/jmi.64.233
  • 査読あり
• [雑誌論文] A case with concurrent duplication, triplication, and uniparental isodisomy at 1q42.12-qter supporting microhomology-mediated break-induced replication model for replicative rearrangements (2017)
  • 著者名/発表者名: Kohmoto T, Okamoto N, Naruto T, Murata C, Ouchi Y, Fujita N, Inagaki H, Satomura S, Okamoto N, Saito M, Masuda K, Kurahashi H, Imoto I
  • 雑誌名: Mol Cytogenet 巻: 18 ページ: -
  • DOI: 10.1186/s13039-017-0316-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] RNA Binding Proteins and Genome Integrity (2017)
  • 著者名/発表者名: Nishida K, Kuwano Y, Nishikawa T, Masuda K, Rokutan K
  • 雑誌名: Int J Mol Sci 巻: 18 ページ: -
  • DOI: 10.3390/ijms18071341
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The first Japanese patient with mandibular hypoplasia, deafness, progeroid features and lipodystrophy diagnosed via POLD1 mutation detection (2017)
  • 著者名/発表者名: Okada A, Kohmoto T, Naruto T, Yokota I, Kotani Y, Shimada A, Miyamoto Y, Takahashi R, Goji A, Masuda K, Kagami S, Imoto I
  • 雑誌名: Hum Genome Var 巻: 4 ページ: -
  • DOI: 10.1038/hgv.2017.31
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Novel CLCN7 compound heterozygous mutations in intermediate autosomal recessive osteopetrosis (2017)
  • 著者名/発表者名: Okamoto N, Kohmoto T, Naruto T, Masuda K, Komori T, Imoto I
  • 雑誌名: Hum Genome Var 巻: 4 ページ: -
  • DOI: 10.1038/hgv.2017.36
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Functional modification of TIA1 could be a potential therapeutic target for esophageal squamous cell carcinoma (2017)
  • 著者名/発表者名: Masuda K, Hamada J, Fujita Y, Shoda K, Kohmoto T, Tange S, Imoto I
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Identification of CPIG7.2 as a candidate for triple-negative breast cancer -associated gene through pan-cancer analysis (2017)
  • 著者名/発表者名: Tange S, Masuda K, Kohmoto T, Tajima A, Imoto I
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Identification of novel tumor-promoting gene, OEGC1, as a putative prognosticator for gastric cancer (2017)
  • 著者名/発表者名: Kohmoto T, Masuda K, Shoda K, Tange S, Imoto I
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] RNA結合蛋白質TIA1の機能調節に着目した新規食道癌治療法の開発 (2017)
  • 著者名/発表者名: Masuda K, Kohmoto T, Hamada J, Shoda K, Fujita Y, Tange S, Saito M, Imoto I
  • 学会等名: 第40回日本分子生物学会年会
• [備考] 食道がんの進行に関わるマイクロRNAを制御する新しいがん促進分子KHSRPの同定とその分子機構の解明
  • URL: http://www.tokushima-u.ac.jp/docs/2017092100035/