TRPA1チャネルを標的とした消化管狭窄治療薬のin vivoスクリーニング

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K08978
• 研究機関: 福岡大学
• 研究代表者: 倉原 琳 (海琳) 福岡大学, 医学部, 講師 (00341438)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 線維化狭窄 / TRPA1チャネル / ステロイド / ピルフェニドン / クローン病

研究実績の概要

我々は、TRPA1チャネルの活性化が、ステロイド、ピルフェニドンの抗線維化作用に関わることを見出した。（1）TRPA1 mRNAは、筋線維芽細胞において高度に発現され、ヒトCD患者の腸の狭窄領域において顕著にアップレギュレートされた。 （2）TNBS腸炎モデルマウスのデータからTRPA1-KOマウスの方がより重篤な炎症や線維化が観察され、炎症性細胞浸潤を伴う結腸の粘膜および粘膜下層に間質線維化を示した。野生型マウスにプレドニゾロンで1週間処置したマウスでは線維化が抑制されたのに対し、TRPA1-KOマウスでは治療効果を示さなかった。（3）ピルフェニドンおよびステロイドは、TRPA1選択的アゴニストAITCと同様に、TRPA1チャネル活性化を介してCa2+流入を惹起した。これらの化合物はまた、TGF-β誘発線維化を抑制し、InMyoFibsにおけるHSP47発現を抑制した。 （4）CD患者およびTNBSマウスの線維化部位粘膜下層にTRPA1 / HSP47-二重陽性細胞が増生した。 CD患者の狭窄領域では、多数の細胞が粘膜下層のTRPA1およびHSP47に対して免疫陽性であり、多数のコラーゲン線維が染色され、線維化マーカーが有意にアップレギュレートされていた。特に、TRPA1およびHSP47の両分子は、温度刺激だけでなく、多くの他の物理化学的刺激によっても活性化されることが知られている。
この新しい抗線維化分子標的TRPA1の同定は、ステロイドおよびピルフェニドンの薬理学的作用のさらなる研究に繋がるだけでなく、異なる抗線維性薬物の相加的/相乗的効果および副作用を説明できる可能性がある。我々の知見は、炎症性腸疾患の抗炎症・抗線維化治療のための新規分子標的を示し、腸内の炎症および線維症の病態生理を明らかにする有意義な情報を提示した。本研究内容はCMGHに掲載された。

研究成果

• [雑誌論文] Activation of myofibroblast TRPA1 by steroids and pirfenidone ameliorates fibrosis in experimental Crohn’s disease model (2018)
  • 著者名/発表者名: Lin Hai Kurahara, Keizo Hiraishi, Yaopeng Hu, Kaori Koga, Miki Onitsuka, Mayumi Doi, Kunihiko Aoyagi, Hidetoshi Takedatsu, Daibo Kojima, Yoshitaka Fujihara, Yuwen Jian, Ryuji Inoue
  • 雑誌名: Cell Mol Gastroenterol Hepatol 巻: 5 ページ: 299-318
  • DOI: 10.1016/j.jcmgh.2017.12.005. eCollection 2018 Mar.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Uncovering the arrhythmogenic potential of TRPM4 activation in atrial-derived HL-1 cells using novel recording and numerical approaches (2017)
  • 著者名/発表者名: Hu Y, Duan Y, Takeuchi A, Hai-Kurahara L, Ichikawa J, Hiraishi K, Numata T, Ohara H, Iribe G, Nakaya M, Mori MX, Matsuoka S, Ma G, Inoue R.
  • 雑誌名: Cardiovasc Res. 巻: 113 ページ: 1243-1255
  • DOI: 10.1093/cvr/cvx117.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] 「経腸栄養と消化管免疫」 (2017)
  • 著者名/発表者名: 土居二人、土居麻友美、倉原琳*、井上隆司
  • 雑誌名: 月刊「臨床栄養」臨時増刊号 巻: 402-409 ページ: 402-409
  • 査読あり
• [学会発表] TRPA1チャネルの活性化物質は消化管炎症や線維化を抑制する (2018)
  • 著者名/発表者名: 倉原 琳、平石敬三、胡 耀鵬、土居麻友美、古賀佳織、鬼塚美樹、井上隆司
  • 学会等名: 第95回日本生理学会大会 [シンポジウム]
• [学会発表] Significant contribution of intestinal myofibroblast TRPA1 channel to the pathogenesis of Crohn's disease fibrotic stenosis (2017)
  • 著者名/発表者名: Kurahara H-L
  • 学会等名: BIT's 2nd Annual World Congress of Digestive Disease - 2017
• [学会発表] 大建中湯による消化管筋線維芽細胞TRPA1チャネル活性化は抗炎症・抗線維化をもたらす (2017)
  • 著者名/発表者名: 倉原 琳、平石敬三、胡 耀鵬、古賀佳織、鬼塚美樹、竹田津英稔、小島大望、井上隆司
  • 学会等名: 第59回日本平滑筋学会総会
• [学会発表] クローン病における腸狭窄線維化の抑制機序：筋線維芽細胞TRPA1チャネルの役割 (2017)
  • 著者名/発表者名: 倉原 琳、平石敬三、胡 耀鵬、古賀佳織、鬼塚美樹、竹田津英稔、小島大望、井上隆司
  • 学会等名: 生理学研究所TRP研究会2017
• [備考] 福岡大学 プレスリリース
  • URL: https://www.fukuoka-u.ac.jp/press/upload/pr20180214.pdf