リアノジン受容体分子内シグナル伝達のキードメインを標的とした新しい不整脈治療

2015 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 15K09085
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 山本 健 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50363122)
• 研究分担者: 小田 哲郎 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (40569290) ; 小林 茂樹 山口大学, 医学部附属病院, 講師 (90397993)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: E-C coupling / リアノジン受容体 / カルモジュリン / 筋小胞体

研究実績の概要

RyR2のCaM LD内に変異があるN4103K KIマウスにおける催不整脈性の検討
申請者らはすでに、N4103KというヒトCPVTと同じ点突然変異をもったRyR2 N4103K KIマウスを作成し当大学の生命科学実験施設にて繁殖に成功した。KI マウスでは、トレッドミルによる運動負荷においては重篤な不整脈の誘発は認めなかった。エピネフリン負荷においてはVTが誘発された。一方、WT マウスにおいては同様の手技を試みるもVTは誘発されなかった。
このマウスのRyR2に対するCaMの結合親和性を蛍光ラベルしたCaM(F-CaM)を用いて測定したところ、低下していることが確認できた。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

N4103K KIマウスの表現型の解析、RyR2に対するCaM親和性の解析が計画通りの研究が進行している。

今後の研究の推進方策

今後N4103K KIマウス心筋細胞に対するCaMのaffinityの検討やF-DP4066の結合解離kineticsを検討することでN4103K型の点突然変異ではCaM BD-CaM LDの連関の異常を解明する。

研究成果

• [雑誌論文] Oxidation of ryanodine receptor (RyR) and calmodulin enhance Ca release and pathologically alter, RyR structure and calmodulin affinity. (2015)
  • 著者名/発表者名: Oda T, Yang Y, Uchinoumi H, Thomas DD, Chen-Izu Y, Kato T, Yamamoto T, Yano M, Cornea RL, Bers DM.
  • 雑誌名: J Mol Cell Cardiol 巻: 85 ページ: 240-248
  • DOI: 10.1016/j.yjmcc.2015.06.009
  • 査読あり
• [学会発表] Ryanodine Receptor Bound Calmodulin as a Novel Therapeutic Target of Heart Failure and Cardiac Hypertrophy (2016)
  • 著者名/発表者名: 山本 健
  • 学会等名: 日本循環器学会
  • 発表場所: 仙台国際センター（宮城県仙台市）
  • 年月日: 2016-03-18 – 2016-03-21
  • 招待講演
• [学会発表] Dantrolene Enhances Binding of Calmodulin to RyR2 in CPVT Which Mutation Located at Central Domain but Does Not Enhance That in CPVT with Mutation at CaM-like Domain (2015)
  • 著者名/発表者名: Shigehiko Nishimura, Takeshi Yamamoto, Go Fukui, Takako Maeda, Akihiro Hino, Takeshi Suetomi, Makoto Ono, Mamoru Mochizuki, Tetsuro Oda, Shinichi Okuda, Shigeki Kobayashi, Masafumi Yano
  • 学会等名: AHA Scientific Sessions 2015
  • 発表場所: Orlando, FL (USA)
  • 年月日: 2015-11-07 – 2015-11-11
  • 国際学会
• [学会発表] High Affinity CaM, but Not Normal Affinity CaM Can Prevent Arrhythmias in CPVT Which Mutation Is Located at CaM-like Domain of RyR2 (2015)
  • 著者名/発表者名: Shigehiko Nishimura, Takeshi Yamamoto, Go Fukui, Takako Maeda, Akihiro Hino, Takeshi Suetomi, Makoto Ono, Mamoru Mochizuki, Tetsuro Oda, Shinichi Okuda, Shigeki Kobayashi, Masafumi Yano
  • 学会等名: AHA Scientific Sessions 2015
  • 発表場所: Orlando, FL (USA)
  • 年月日: 2015-11-07 – 2015-11-11
  • 国際学会
• [学会発表] Dantrolene Cannot Inhibit Aberrant Ca2+ Release and Arrhythmias Without Calmodulin in Pressure Overload Heart Failure. (2015)
  • 著者名/発表者名: Go Fukui, Takeshi Yamamoto, Takayoshi Kato, Takako Maeda, Shigehiko Nishimura, Akihiro Hino, Takeshi Suetomi, Makoto Ono, Mamoru Mochizuki, Tetsuro Oda, Shinichi Okuda, Shigeki Kobayashi, Masafumi Yano
  • 学会等名: AHA Scientific Sessions 2015
  • 発表場所: Orlando, FL (USA)
  • 年月日: 2015-11-07 – 2015-11-11
  • 国際学会