エクソームシーケンスを用いた新規高比重リポ蛋白代謝制御因子の発見とその機能解析

2015 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 15K09118
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 川尻 剛照 金沢大学, 医学系, 准教授 (90345637)
• 研究分担者: 野原 淳 金沢大学, 医薬保健学総合研究科, 特任准教授 (50313648) ; 多田 隼人 金沢大学, 大学病院, 助教 (90623653)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 高比重リポ蛋白 / 動脈硬化 / 全エクソームシーケンス

研究実績の概要

動脈硬化症予防を目的に、症例に立脚した高比重リポ蛋白（HDL）代謝異常症の病態解明を目指した研究を試みた。発端者は①著明な高HDLコレステロール血症（170mg/dL）と②著明な低HDLコレステロール血症（2、6mg/dL）症例である。
低HDLコレステロールコレステロール血症の遺伝子DNAを用い、②2人の低HDLコレステロール血症患者と2人の家系内正常者、4人の非血縁正常者を対象に全エクソームシーケンスを行った。SnpEffを用い両性変異、1%以上の頻度を認める変異、劣性遺伝に合致しない変異、C-スコア<10を除外した結果、ABCA1遺伝子にコンパウンドヘテロ変異（c.6230C>A/c.6137G>A、c.2842G>A/c.1130C>T）を認め、いずれの症例もTangier病と診断した（Tada H, Kawashiri M et al. Atherosclerosis 240:324-329;2015）。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

全エクソームシーケンス法で著明な低HDLコレステロール血症（2、6mg/dL）2例の遺伝子解析を終了した。新規遺伝子ではなかったため、機能解析は見送ることにした。

今後の研究の推進方策

著明な高HDLコレステロール血症（170mg/dL）症例に見出された新規候補「分子X」に関し、機能解析を行う予定である。具体的には、遺伝子過剰発現マウス・遺伝子欠損マウスを樹立し、脂質値を検討し、アポE欠損マウスと交配し、遺伝子改変マウスの動脈硬化病理組織を検討する予定である。

次年度使用額が生じた理由

低HDLコレステロール血症の原因遺伝子がABCA1（Tangier病）で新規でなかったため、機能解析を行う必要性がなくなったため。

次年度使用額の使用計画

高HDLコレステロール血症の新規候補「分子X」の機能解析が現在のところ進捗していない。遺伝子欠損マウス、遺伝子導入マウスの樹立にはかなりの出費が想定されており、これらに充てる予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Common and Rare Variant Association Study for Plasma Lipids and Coronary Artery Disease. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tada H, Kawashiri MA, Konno T, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: J Atheroscler Thromb. 巻: 23 ページ: 241-256
  • DOI: 10.5551/jat.31393.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Lipoprotein(a) in Familial Hypercholesterolemia With Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 (PCSK9) Gain-of-Function Mutations. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tada H, Kawashiri MA, Yoshida T, Teramoto R, Nohara A, Konno T, Inazu A, Mabuchi H, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: Circ J. 巻: 80 ページ: 512-518
  • DOI: 10.1253/circj.CJ-15-0999.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Usefulness of Electrocardiographic Voltage to Determine Myocardial Fibrosis in Hypertrophic Cardiomyopathy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Konno T, Nagata Y, Teramoto R, Fujino N, Nomura A, Tada H, Sakata K, Furusho H, Takamura M, Nakamura H, Kawashiri MA, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: Am J Cardiol. 巻: 117 ページ: 443-449
  • DOI: 10.1016/j.amjcard.2015.11.015.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A de novo mutation of the LDL receptor gene as the cause of familial hypercholesterolemia identified using whole exome sequencing. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tada H, Hosomichi K, Okada H, Kawashiri MA, Nohara A, Inazu A, Tomizawa S, Tajima A, Mabuchi H, Hayashi K.
  • 雑誌名: Clin Chim Acta. 巻: 453 ページ: 194-196
  • DOI: 10.1016/j.cca.2015.12.028.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Exome sequencing in suspected monogenic dyslipidemias. (2015)
  • 著者名/発表者名: Stitziel NO, Kawashiri MA, Nohara A, Yamagishi M, Kathiresan S et al.
  • 雑誌名: Circ Cardiovasc Genet. 巻: 8 ページ: 343-350
  • DOI: 10.1161/CIRCGENETICS.114.000776.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Infantile Cases of Sitosterolaemia with Novel Mutations in the ABCG5 Gene: Extreme Hypercholesterolaemia is Exacerbated by Breastfeeding. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tada H, Kawashiri MA, Takata M, Matsunami K, Imamura A, Matsuyama M, Sawada H, Nunoi H, Konno T, Hayashi K, Nohara A, Inazu A, Kobayashi J, Mabuchi H, Yamagishi M.
  • 雑誌名: JIMD Rep. 巻: 21 ページ: 115-122
  • DOI: 10.1007/8904_2014_404.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of Enhanced Production of Endogenous Heme Oxygenase-1 by Pitavastatin on Survival and Functional Activities of Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawashiri MA, Nakanishi C, Tsubokawa T, Shimojima M, Yoshida S, Yoshimuta T, Konno T, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: J Cardiovasc Pharmacol. 巻: 65 ページ: 601-606
  • DOI: 10.1097/FJC.0000000000000231.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Expansion of the clinical application of optical coherence tomography to percutaneous coronary intervention and assessment of the instability of coronary atherosclerosis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sakata K, Kawashiri MA, Hayashi K.
  • 雑誌名: Circ J. 巻: 79 ページ: 513-514
  • DOI: 10.1253/circj.CJ-15-0103.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Extreme Contrast of Postprandial Remnant-Like Particles Formed in Abetalipoproteinemia and Homozygous Familial Hypobetalipoproteinemia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawashiri MA, Tada H, Hashimoto M, Taniyama M, Nakano T, Nakajima K, Inoue T, Mori M, Nakanishi C, Konno T, Hayashi K, Nohara A, Inazu A, Koizumi J, Ishihara H, Kobayashi J, Hirano T, Mabuchi H, Yamagishi M.
  • 雑誌名: JIMD Rep. 巻: 22 ページ: 85-94
  • DOI: 10.1007/8904_2015_415.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Whole exome sequencing combined with integrated variant annotation prediction identifies asymptomatic Tangier disease with compound heterozygous mutations in ABCA1 gene. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tada H, Kawashiri MA, Nohara A, Saito R, Tanaka Y, Nomura A, Konno T, Sakata K, Fujino N, Takamura T, Inazu A, Mabuchi H, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: Atherosclerosis. 巻: 240 ページ: 324-329
  • DOI: 10.1016/j.atherosclerosis.2015.04.003.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Whole Exome Sequencing in Monogenic Dyslipidemias. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tada H, Kawashiri MA, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: J Atheroscler Thromb. 巻: 22 ページ: 881-885
  • DOI: 10.5551/jat.ED016.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Right ventricular hypertrophy is associated with cardiovascular events in hypertrophic cardiomyopathy: evidence from study with magnetic resonance imaging. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nagata Y, Konno T, Fujino N, Hodatsu A, Nomura A, Hayashi K, Nakamura H, Kawashiri MA, Yamagishi M.
  • 雑誌名: Can J Cardiol. 巻: 31 ページ: 702-708
  • DOI: 10.1016/j.cjca.2014.12.036.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Impact of Elevated D-Dimer on Diagnosis of Acute Aortic Dissection With Isolated Neurological Symptoms in Ischemic Stroke. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshimuta T, Yokoyama H, Okajima T, Tanaka H, Toyoda K, Nagatsuka K, Higashi M, Hayashi K, Kawashiri MA, Yasuda S, Yamagishi M.
  • 雑誌名: Circ J. 巻: 79 ページ: 1841-1845
  • DOI: 10.1253/circj.CJ-15-0050.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Atrial fibrillation: an inherited cardiovascular disease-a commentary on genetics of atrial fibrillation: from families to genomes. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tada H, Kawashiri MA, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: J Hum Genet. 巻: 61 ページ: 3-4
  • DOI: 10.1038/jhg.2015.63.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Xiphodynia Mimicking Acute Coronary Syndrome. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tanaka Y, Sakata K, Waseda Y, Fujimura T, Yamada K, Oyama T, Kawashiri MA, Yamagishi M.
  • 雑誌名: Intern Med. 巻: 54 ページ: 1563-1566
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.54.3449.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Electrocardiographic QRS Fragmentation as a Marker for Myocardial Fibrosis in Hypertrophic Cardiomyopathy. (2015)
  • 著者名/発表者名: Konno T, Hayashi K, Fujino N, Oka R, Nomura A, Nagata Y, Hodatsu A, Sakata K, Furusho H, Takamura M, Nakamura H, Kawashiri MA, Yamagishi M.
  • 雑誌名: J Cardiovasc Electrophysiol. 巻: 26 ページ: 1081-1087
  • DOI: 10.1111/jce.12742.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Functional Characterization of Rare Variants Implicated in Susceptibility to Lone Atrial Fibrillation. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hayashi K, Konno T, Tada H, Tani S, Liu L, Fujino N, Nohara A, Hodatsu A, Tsuda T, Tanaka Y, Kawashiri MA, Ino H, Makita N, Yamagishi M.
  • 雑誌名: Circ Arrhythm Electrophysiol. 巻: 8 ページ: 1095-1104
  • DOI: 10.1161/CIRCEP.114.002519.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Impact of real-time three-dimensional transesophageal echocardiography on procedural success for mitral valve repair. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mori M, Yoshimuta T, Ohira M, Yagi M, Sakata K, Konno T, Kawashiri MA, Tomita S, Watanabe G, Iino K, Takemura H, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: J Echocardiogr. 巻: 13 ページ: 100-106
  • DOI: 10.1007/s12574-015-0255-3.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Clinical characteristics of Japanese patients with severe hypertriglyceridemia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tada H, Kawashiri MA, Nakahashi T, Yagi K, Chujo D, Ohbatake A, Mori Y, Mori S, Kometani M, Fujii H, Nohara A, Inazu A, Mabuchi H, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: J Clin Lipidol. 巻: 9 ページ: 519-524
  • DOI: 10.1016/j.jacl.2015.05.004.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Characterization of Autosomal Dominant Hypercholesterolemia Caused by PCSK9 Gain of Function Mutations and Its Specific Treatment With Alirocumab, a PCSK9 Monoclonal Antibody. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hopkins PN, , Mabuchi H, Kawashiri MA, Nohara A, Tada H, Swergold GD et al.
  • 雑誌名: Circ Cardiovasc Genet. 巻: 8 ページ: 823-831
  • DOI: 10.1161/CIRCGENETICS.115.001129.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Determination of Early and Late Endothelial Progenitor Cells in Peripheral Circulation and Their Clinical Association with Coronary Artery Disease. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tagawa S, Nakanishi C, Mori M, Yoshimuta T, Yoshida S, Shimojima M, Yokawa J, Kawashiri MA, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: Int J Vasc Med. 巻: 2015 ページ: 674213
  • DOI: 10.1155/2015/674213.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Abrupt progression of ventricular septal perforation after primary angioplasty for acute myocardial infarction. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nakahashi T, Sakata K, Tsuda T, Tanaka Y, Ohira M, Mori M, Takata M, Kawashiri MA, Takemura H, Yamagishi M, Hayashi K.
  • 雑誌名: Cardiovasc Diagn Ther. 巻: 5 ページ: 479-483
  • DOI: 10.3978/j.issn.2223-3652.2015.06.06.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] PCSK9の発見と新たなコレステロール低下剤の開発 (2015)
  • 著者名/発表者名: 川尻剛照
  • 学会等名: 日本人類遺伝学会第60回大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2015-10-14 – 2015-10-17
  • 招待講演
• [学会発表] 家族性高コレステロール血症の診断と治療の重要性 冠動脈疾患発症抑制のために (2015)
  • 著者名/発表者名: 川尻剛照
  • 学会等名: 第24回日本心血管インターベンション治療学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2015-07-30 – 2015-08-01
• [学会発表] A patient with compound heterozygous familial hypercholesterolemia accompanied with supravalvular aortic stenosis detected by Whole Exome Sequencing (2015)
  • 著者名/発表者名: 川尻剛照、多田隼人、井上健、中西千明、森三佳、野原淳、稲津明広、馬渕宏、山岸正和
  • 学会等名: 第47回日本動脈硬化学会総会・学術集会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2015-07-09 – 2015-07-10
• [学会発表] 家族性高コレステロール血症を見逃さない (2015)
  • 著者名/発表者名: 川尻剛照
  • 学会等名: 第1回国際心血管薬物療法学会日本部会学術集会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2015-06-20 – 2015-06-21
  • 招待講演
• [学会発表] Vascular Complications in Japanese FH Patients (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawashiri M
  • 学会等名: The Satellite Symposium of the ISA 2015 in Tokyo
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 2015-05-21
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Myocardial ischemia treated with PCI and plaque regression by lipid lowering & blood pressure controlling assessed by intravascular ultrasonography (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawashiri M, Yamagishi M, MILLION study group
  • 学会等名: The Society for Cardiovascular Angiography and Intervention
  • 発表場所: San Diego
  • 年月日: 2015-05-06 – 2015-05-09
  • 国際学会
• [図書] 診断と治療のABC 高LDL-C血症・低HDL-C血症 (2015)
  • 著者名/発表者名: 川尻剛照
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: 最新医学社
• [図書] PCSK9阻害剤 (2015)
  • 著者名/発表者名: 川尻剛照
  • 総ページ数: 9
  • 出版者: メディカルビュー社 血管医学
• [図書] PCSK9をターゲットとした新しい治療を識る (2015)
  • 著者名/発表者名: 川尻剛照
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: メディカルビュー社 Heart View
• [図書] LDLアフェレシス (2015)
  • 著者名/発表者名: 川尻剛照、多田隼人、山岸正和
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: メディカルレビュー社 The Lipid
• [図書] 頚動脈エコーで石灰化していない低輝度～等輝度プラークに効果的な薬剤は？ (2015)
  • 著者名/発表者名: 川尻剛照
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 日本医事新報社 週刊日本医事新報