遺伝子改変マウスを用いた抗癌剤耐性肺癌の新規治療法の開発

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 15K09170
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: Gabazza Esteban 三重大学, 医学系研究科, 教授 (00293770)
• 研究分担者: 戸田 雅昭 三重大学, 医学系研究科, 講師 (10202201) ; GABAZZA CORINA 三重大学, 医学系研究科, 特任助教(研究担当) (10750656)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 癌 / 転写因子 / Akt経路 / NF-κB / チロシンキナーゼ阻害剤 / TKI耐性 / 耐性克服 / 肺癌

研究実績の概要

平成２８年度では、「Ｌ８５８Ｒ」ＥＧＦＲ（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ）過剰発現肺癌マウスモデル及びチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）に対して耐性を示す「Ｌ８５８Ｒ　＋　Ｔ７９０Ｍ」ＥＧＦＲ（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ）過剰発現肺癌マウスモデルを用いてＡｋｔの転写因子の活性化、ＰＤ－Ｌ１（ｐｒｏｇｒａｍ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　ｌｉｇａｎｄ－１）、ＰＤ－１などの免疫チェックポイントの組織発現、可溶性ＥＧＦＲ（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ）、可溶性ＰＤ－Ｌ１（ｐｒｏｇｒａｍ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　ｌｉｇａｎｄ－１）、気道上皮細胞障害のマーカーであるＳＰ－ＡとＳＰ－Ｄの血中濃度を測定した。
Ｉｎ　ｖｉｔｒｏとｉｎ　ｖｉｖｏの実験系において人工的に合成したＡｋｔとＮＦκＢのｓｉＲＮＡの効果も検討した。
その結果、各々の肺癌マウスモデルではＡｋｔの伝達経路は有意に活性化し、ＰＤ－Ｌ１（ｐｒｏｇｒａｍ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　ｌｉｇａｎｄ－１）とＰＤ－１の組織発現は有意に高く、可溶性ＥＧＦＲ（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ）、可溶性ＰＤ－Ｌ１（ｐｒｏｇｒａｍ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　ｌｉｇａｎｄ－１）及びＳＰ－ＡとＳＰ－Ｄの血中濃度はコントロールマウスに比べ有意に高値を示した。
Ａｋｔ ｓｉＲＮＡの投与によりＴＫＩに対する耐性の克服傾向が認められた。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

平成28年度では肺癌のバイオ―マーカーの上昇の確認及び予備実験で転写因子に対するsiRNAの抑制効果の確認ができたので、29年度の研究目標は達成できる見込みである。

今後の研究の推進方策

平成29年度では、EGFR-TKI耐性の肺癌モデルマウスにおいてAktのsiRNAの抑制効果の再現性を検討する。また、同モデルを用いてNF-κB、cMET、RASのsiRNAによるTKI耐性の克服も併せて検討する。

研究成果

• [雑誌論文] Interleukin-33 induces mucin gene expression and goblet cell hyperplasia in human nasal epithelial cells. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ishinaga H, Kitano M, Toda M, D'Alessandro-Gabazza CN, Gabazza EC, Shah SA, Takeuchi K
  • 雑誌名: Cytokine 巻: 90 ページ: 60-65
  • DOI: 10.1016/j.cyto.2016.10.010.
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Restrictive IL-10 induction by an innocuous parainfluenza virus vector ameliorates nasal allergy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yamanaka K, Nakanishi T, Isono K, Hasegawa C, Inada H, Mizutani K, Matsushima Y, Okada K, Mabuchi T, Kondo M, Yamagiwa A, Kakeda M, Habe K, Nosaka T, Gabazza EC, Yamazaki H, Mizutani H, Kawano M
  • 雑誌名: J Allergy Clin Immunol 巻: 139 ページ: 682-686
  • DOI: 10.1016/j.jaci.2016.05.044.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Sequential Therapy with Crizotinib and Alectinib in ALK-Rearranged Non-Small Cell Lung Cancer-A Multicenter Retrospective Study. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ito K, Hataji O, Kobayashi H, Fujiwara A, Yoshida M, D'Alessandro-Gabazza CN, Itani H, Tanigawa M, Ikeda T, Fujiwara K, Fujimoto H, Kobayashi T, Gabazza EC, Taguchi O, Yamamoto N
  • 雑誌名: J Thorac Oncol 巻: 12 ページ: 390-396
  • DOI: 10.1016/j.jtho.2016.07.022.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Sequential Use of ALK Inhibitors: An Optional Approach. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ito K, Hataji O, Fujimoto H, Kobayashi T, D'Alessandro-Gabazza CN, Gabazza EC
  • 雑誌名: J Thorac Oncol 巻: 11 ページ: e153-e154
  • DOI: 10.1016/j.jtho.2016.10.005.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Efficacy of crizotinib in ALK fusion variants. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Fujimoto H, Gabazza EC
  • 雑誌名: J Thorac Dis 巻: 8 ページ: E1381-E1383
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] "Pseudoprogression" of Pulmonary Pleomorphic Carcinoma during Nivolumab Therapy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ito K, Hataji O, Katsuta K, Kobayashi T, Gabazza EC, Yatabe Y, Taguchi O, Yamamoto N.
  • 雑誌名: J Thorac Oncol 巻: 11 ページ: e117-ｅ119
  • DOI: 10.1016/j.jtho.2016.05.002.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Enhanced wound healing by topical application of ointment containing a low concentration of povidone-iodine. (2016)
  • 著者名/発表者名: Mitani O, Nishikawa A, Kurokawa I, Gabazza EC, Ikeda M, Mizutani H
  • 雑誌名: J Wound Care 巻: 25 ページ: 521-529
  • DOI: 10.12968/jowc.2016.25.9.521.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Protein S is protective in pulmonary fibrosis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Urawa M, Kobayashi T, D'Alessandro-Gabazza CN, Fujimoto H, Toda M, Roeen Z, Hinneh JA, Yasuma T, Takei Y, Taguchi O, Gabazza EC
  • 雑誌名: J Thromb Haemost 巻: 14 ページ: 1588-1599
  • DOI: 10.1111/jth.13362.
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Amelioration of Diabetes by Protein S. Diabetes. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yasuma T, Yano Y, D'Alessandro-Gabazza CN, Toda M, Gil-Bernabe P, Kobayashi T, Nishihama K, Hinneh JA, Mifuji-Moroka R, Roeen Z, Morser J, Cann I, Motoh I, Takei Y, Gabazza EC
  • 雑誌名: Diabetes 巻: 65 ページ: 1940-1951
  • DOI: 10.2337/db15-1404.
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Smart watch for monitoring physical activity in patients with chronic obstructive pulmonary disease. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hataji O, Kobayashi T, Gabazza EC
  • 雑誌名: Respir Investig 巻: 54 ページ: 294-295
  • DOI: 10.1016/j.resinv.2016.01.003.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Circulating fibrocytes correlate with the asthma control test score. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi H, Naito M, Masuya M, Maruyama M, Urata K, Takahashi Y, Tomaru A, Fujiwara K, Ohnishi M, Takagi T, Kobayashi T, D'Alessandro-Gabazza C, Urawa M, Gabazza EC, Taguchi O, Takei Y
  • 雑誌名: Allergol Immunopathol (Madr) 巻: 44 ページ: 191-196
  • DOI: 10.1016/j.aller.2015.09.007.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Association of Waist Circumference and Body Fat Weight with Insulin Resistance in Male Subjects with Normal Body Mass Index and Normal Glucose Tolerance. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sasaki R, Yano Y, Yasuma T, Onishi Y, Suzuki T, Maruyama-Furuta N, Gabazza EC, Sumida Y, Takei Y
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 55 ページ: 1425-1432
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.55.4100.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Jejunoiletitis Associated with Adult-onset Familial Mediterranean Fever. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kitade T, Horiki N, Katsurahara M, Harada T, Tano S, Yamada R, Hamada Y, Inoue H, Gabazza EC, Hayashi H, Tanaka M, Takei Y
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 55 ページ: 1239-1239
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.55.6365.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 肺線維化におけるProteinSの保護効果と治療薬としての可能性 (2016)
  • 著者名/発表者名: 藤本 源、小林 哲、浅山 健太郎、高橋 佳紀、都丸 敦史、藤原 研太郎、大西 真裕、中原 博紀、田口 修、ガバザ エステバン
  • 学会等名: 第44回吸入療法研究会
  • 発表場所: ベルサール八重洲（東京都・中央区）
  • 年月日: 2016-11-26 – 2016-11-26
• [学会発表] 進行する挿管後気管狭窄に対して気管切開、気道ステント留置術を施工した1例 (2016)
  • 著者名/発表者名: 中原 博紀、小林 哲、浅山 健太郎、都丸 敦史、高橋 佳紀、藤原 研太郎、大西 真裕、藤本 源、ガバザ エステバン、田口 修
  • 学会等名: 第39回日本呼吸器内視鏡学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県・名古屋市）
  • 年月日: 2016-06-23 – 2016-06-24
• [学会発表] 膵β細胞にマトリックスメタロプロテイナーゼ2が与える影響についての検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 西濵康太，竹下敦郎，Josephine Hinneh，原田栄津子，安間太郎，D’Alessandro Corina Gabazza，戸田雅昭，矢野裕，Esteban Gabazza，竹井謙之
  • 学会等名: 第59回日本糖尿病学会年次学術集会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2016-05-19 – 2016-05-21
• [学会発表] 気管支喘息におけるプロテインSの抗炎症作用に関する検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 浅山 健太郎、小林 哲、高橋 佳紀、都丸 敦史、藤原 研太郎、大西 真裕、中原 博紀、藤本 源、Corina Gabazza、Esteban Gabazza、田口 修
  • 学会等名: 第56回日本呼吸器学会学術講演会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2016-04-08 – 2016-04-10
• [学会発表] hMMP-2 COPDマウスモデルにおけるNF-kB siRNAの抑制効果 (2016)
  • 著者名/発表者名: 大西 真裕、小林 哲、浅山 健太郎、高橋 佳紀、都丸 敦史、藤原 研太郎、中原 博紀、藤本 源、Corina N. D’Alessandro Gabazza、Esteban C. Gabazza、田口 修
  • 学会等名: 第56回日本呼吸器学会学術講演会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2016-04-08 – 2016-04-10
• [学会発表] 肺線維症における細菌叢の検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 小林 哲、浦田 健太郎、都丸 敦史、高橋 佳紀、藤原 研太郎、大西 真裕、中原 博紀、藤本 源、Corina D’Alessandro Gabazza、Esteban Gabazza、田口 修
  • 学会等名: 第56回日本呼吸器学会学術講演会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2016-04-08 – 2016-04-10
• [学会発表] ヒト変異EGFR遺伝子全長を組み込んだ肺癌モデルマウスの作製 (2016)
  • 著者名/発表者名: 藤原 研太郎、小林 哲、浅山 健太郎、都丸 敦史、高橋 佳紀、大西 真裕、中原 博紀、藤本 源、Corina N. D’Alessandro Gabazza、Esteban C. Gabazza、田口 修
  • 学会等名: 第56回日本呼吸器学会学術講演会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2016-04-08 – 2016-04-10
• [学会発表] ヒト変異EGFR遺伝子全長を組み込んだ肺癌モデルマウスにおける免疫チェックポイント分子の発現について (2016)
  • 著者名/発表者名: 高橋 佳紀、小林 哲、浅山 健太郎、都丸 敦史、藤原 研太郎、大西 真裕、中原 博紀、藤本 源、ガバザ エステバン、田口 修
  • 学会等名: 第56回日本呼吸器学会学術講演会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2016-04-08 – 2016-04-10
• [学会発表] Matrix metalloproteinase-2(mmp-2)の肺線維症モデルにおける検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 都丸 敦史、小林 哲、浅山 健太郎、高橋 佳紀、藤原 研太郎、大西 真裕、中原 博紀、藤本 源、Corina N. D’Alessandro Gabazza、Esteban C. Gabazza、田口 修
  • 学会等名: 第56回日本呼吸器学会学術講演会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2016-04-08 – 2016-04-10
• [学会発表] ブレオマイシン誘発肺線維症モデルマウスを用いたプロテインSの役割の検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 中原 博紀、小林 哲、浅山 健太郎、都丸 敦史、高橋 佳紀、藤原 研太郎、大西 真裕、藤本 源、Corina D’Alessandro Gabazza、Esteban Gabazza、田口 修
  • 学会等名: 第56回日本呼吸器学会学術講演会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2016-04-08 – 2016-04-10
• [図書] Annual Review 2016呼吸器 (2016)
  • 著者名/発表者名: 小林 哲 ガバザ・エステバン
  • 総ページ数: 233（ｐ6-11）
  • 出版者: 中外医薬社