| 研究課題/領域番号 |
15K09228
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| 研究機関 | 埼玉医科大学 |
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研究代表者 |
中込 一之 埼玉医科大学, 医学部, 准教授 (60401113)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | 喘息増悪 |
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| 研究実績の概要 |
緒言: 喘息はコントロール良好な疾患となったが、喘息増悪は今でもしばしば見られ、増悪の予防及び治療法の確立は重要と考えられる。Cadherin-related family member 3(CDHR3)は、cadherin superfamilyに属する膜貫通の糖蛋白で、気道上皮細胞に発現するが、その機能はよくわかっていない。近年、CDHR3の遺伝子変異は、小児喘息における重度な増悪と関連することが報告された。さらにCDHR3は、ライノウィルスの中で重篤病態を引き起こすとされる、C型ライノウィルスの受容体であることが判明し、喘息増悪に関与する可能性が示唆されている。今回、CDHR3が直接的に好酸球の接着を誘導するかについて検討した。
方法: 健常人の末梢血好酸球を使用した。好酸球は、デキストラン、Percoll液、及びimmunomagnetic beadsによるnegative selectionにて分離した。好酸球をCDHR3でcoatしたplateとincubateし、残存好酸球ペルオキシダーゼ測定法で接着反応を測定した。
結果: CDHR3は好酸球の接着を誘導し、IL-5は好酸球のCDHR3への接着を増強した。
考察: 今研究から、CDHR3は好酸球接着を誘導することが明らかとなった。CDHR3による好酸球接着が、喘息増悪に関連する可能性が考えられた。今後CDHR3の好酸球の他のエフェクター機能(活性酸素産生、脱顆粒など)に対する影響について検討する。さらにCDHR3遺伝子変異の好酸球機能に与える影響について、変異蛋白の使用や変異遺伝子のtransfectionによって、検討する予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
前述の研究実績だけでなく、現在以下のプロジェクトが進行中であり、研究全体ではやや遅れていると思われる。
①好酸球性炎症及び好中球性炎症がライノウィルス(RV)感染に与える影響(RV感染の重症化を規定する要因の解明): RV感染の系で、副鼻腔炎の種類(好中球優位、好酸球優位)で、ウィルス複製能や炎症惹起能力などに差があるか検討する。好酸球性副鼻腔炎及び好中球性副鼻腔炎から得られた副鼻腔上皮細胞を、air-liquid interfaceで培養し、完全に分化させたあと、臨床株RV(RV-A16, B52, C15)を感染させ、上皮細胞におけるウィルス量及び培養液のサイトカイン・ケモカイン濃度を、RT-PCRまたはELISAで測定する。
②抗コリン薬や糖尿病薬の好中球性気道炎症に対する効果: 喫煙や肥満は、重症喘息における好中球性炎症に関与する可能性が指摘されている。実地臨床では、喫煙の伴う慢性閉塞性肺疾患(COPD)には抗コリン薬が、肥満に伴う糖尿病には糖尿病薬が使用される。これらの薬のマウス好中球性気道炎症に対する効果を検討する。
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| 今後の研究の推進方策 |
①好酸球性炎症及び好中球性炎症がRV感染に与える影響(RV感染の重症化を規定する要因の解明)。副鼻腔炎の種類(好中球優位、好酸球優位)で、ウィルス複製能や炎症惹起能力などに差があるか検討する予定である。
②CDHR3の好酸球機能に対する影響。好酸球の接着以外のエフェクター機能に対する影響を検討する予定である。
③抗コリン薬や糖尿病薬の好中球性気道炎症に対する効果。マウス好中球性気道炎症モデルでこれらの好中球性炎症に対する効果を検討する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
耳鼻科医の異動もあって、今年度は、主要プロジェクトである①好酸球性炎症及び好中球性炎症がRV感染に与える影響(RV感染の重症化を規定する要因の解明)における、副鼻腔上皮細胞を入手することがほとんどできなかった。他大学より入手可能となったが、当院での準備が遅れ、現在予備実験中である。
①好酸球性炎症及び好中球性炎症がRV感染に与える影響(RV感染の重症化を規定する要因の解明)：ウィルスを精製したのち、副鼻腔炎の種類(好中球優位、好酸球優位)で、ウィルス複製能や炎症惹起能力などに差があるか検討する予定である。②CDHR3の好酸球機能に対する影響：好酸球の接着以外のエフェクター機能に対する影響を検討する予定である。③抗コリン薬や糖尿病薬の好中球性気道炎症に対する効果：マウス好中球性気道炎症モデルでこれらの好中球性炎症に対する効果を検討する予定である。
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