| 研究課題/領域番号 |
15K09315
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| 研究機関 | 鳥取大学 |
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研究代表者 |
中曽 一裕 鳥取大学, 医学部, 准教授 (30379648)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | シヌクレイン / パーキンソン病 |
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| 研究実績の概要 |
αシヌクレイン発現量およびカテコールアミン代謝を調節することが可能なPC12-TetOFF-αsyn細胞を用い，カテコールアミン代謝とαシヌクレイン分解・安定性および細胞外分泌・細胞間伝播ついて検討を行った．
αシヌクレインは本細胞モデルでは主にオートファジー／リソソーム系タンパク質分解により細胞内分解が行われていることを明らかにした．さらに，細胞内発現量の他の要因であるαシヌクレインの細胞外分泌についても検討した．αシヌクレインはカテコールアミン代謝下では，細胞外への放出が活発であった．分泌機構の検討として，エクソソームを介しての分泌および，非エクソソーム性の分泌を検討した．その結果，両分泌機構の関与が確認されたが，量的には非エクソソーム性の分泌が多かった．これらの挙動にはαシヌクレイン内の特定のメチオニン残基の酸化修飾が一部関係していた．αシヌクレインの細胞内への取り込みについては現在検討中である．
形態学的な検討ではαシヌクレインを成分の一部とする細胞内凝集体の構成成分としてメチオニンスルホキシド還元酵素（酸化修飾メチオニン残基を還元することができる）も構成成分のひとつであることを明らかにした．さらに，生化学的にカテコールアミン存在下ではαシヌクレインとメチオニンスルホキシド還元酵素と共局在していることを明らかにし，カテコールアミン存在下におけるαシヌクレイン細胞内蓄積にメチオニン酸化が関与している可能性が示唆された．
αシヌクレインのカテコールアミン代謝下における毒性および細胞内安定性・蓄積を検討するために，線虫モデルを用いた運動能，病理形態学的検討を開始している．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
PC12-TetOFF-αsyn細胞を用い，カテコールアミン代謝とαシヌクレイン分解・安定性および細胞外分泌・細胞間伝播ついて検討を行った．
αシヌクレインは本細胞モデルでは主にオートファジー／リソソーム系タンパク質分解により細胞内分解が行われていることに加え，細胞外分泌についてはカテコールアミン代謝下で活発であること，さらに分泌機構の検討では量的には非エクソソーム性の分泌が多いことを明らかにし，細胞レベルでの検討は順調に進行した．
病理学的検討，個体レベル（モデル動物）での検討は開始したところであり，概ね予定通りの進行である．
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| 今後の研究の推進方策 |
細胞モデルによる検討は順調であるが，さらに詳細な検討を加える．
今後は病理学的検討および個体レベルでの検討の比重を大きくする予定であり．
特に線虫モデル（北里大学との共同研究）およびマウスを用いた検討を開始したところである．
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| 次年度使用額が生じた理由 |
予算全体としては概ね予定通りに使用したが，消耗品以外への出費が無かったため，13413円残金となった．
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| 次年度使用額の使用計画 |
H28年度，主に消耗品購入へ充当する．
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