| 研究実績の概要 |
平成29年度は，前年度に決定した種々のLC-IT-TOF-MS条件に基づき，本法を定量分析に活用するための条件検討と，実試料への応用を行った．直線性の検討では，ESI(+)で脂質内標準物質 15 種を検出でき，ジアシルグリセロール，コレステロールエステル，コレステロール-d6 以外の11種は0.01~10 μmol/L の範囲で相関係数 r = 0.984 以上の直線性を示した．また，ESI(-)で脂質内標準物質14 種（このうち9種はESI(+)と重複）を検出でき，ホスファチジン酸とホスファチジルセリン以外の12種は0.01～10 μmol/L の範囲で相関係数r = 0.982以上の直線性を示した．これらの分子種の中から実試料に存在が期待されるものを選択し，リゾホスファチジルコリン（12:0及び16:0），ホスファチジルコリン（16:0/16:0），ホスファチジルエタノールアミン（16:0/16:0），ホスファチジルグリセロール（14:0/14:0），スフィンゴミエリン（18:0/16:0），トリアシルグリセロール（8:0/8:0/8:0及び18:2/18:2/18:2）の標準品のピーク面積と同濃度の内標準物質のピーク面積との相関関係について検討した．その結果，何れも0.05~10 μmol/L の範囲で相関係数 r = 0.988 以上の直線性を示した．繰り返し測定 (n=6) のピーク面積の相対標準偏差 (RSD) は，13.4%以下であった. 実試料として経腸栄養剤のツインラインNF 配合経腸用液を用い，Bligh-Dyer法による抽出分画のLC-IT-TOF-MS測定を行ったところ，MS/MSパターンを基に，リノール酸，リゾホスファチジルコリン2 種，ホスファチジルコリン4 種，トリアシルグリセロール5 種を検出できた. ツインラインNFに内標準物質を添加して脂質抽出を行い，LC-IT-TOF-MS測定したところ, 内標準物質とのピーク面積比から，リゾホスファチジルコリン（16:0, 18:2）, ホスファチジルコリン（16:0/16:0, 16:0/18:1, 18:1/18:1, 18:2/18:2）については定量値を予測することができた.
|
