研究課題
慢性甲状腺炎(橋本病)に伴う自己免疫性疾患である“橋本脳症”は免疫治療によって治癒可能な疾患である.申請者らは本症の分子診断マーカーとして患者血清中の自己抗体(抗NAE抗体)を同定している.本研究では,①生物発光を用いた免疫沈降法(LIPS法)による新規の定量的・迅速な自己抗体(抗NAE抗体)の測定法の開発,②橋本脳症の発症・臨床病型・治療効果等の臨床要素を規定する自己抗体の多様性の解明のための,抗原部位(エピトープ)や新規自己抗体の検索,の2点を行う.これによって,橋本脳症の発症予知や早期診断・治療に結びつけることができる自己抗体測定システムを構築する.平成27年度中は,NAE抗原とルシフェラーゼのキメラ蛋白を発現する融合遺伝子を哺乳類発現ベクターに挿入・構築し,生物発光が得られることをルミノメーターを用いて確認できた.一方,平成27年度に全国より橋本脳症が疑われ,抗NAE抗体測定の依頼があった患者血清が300検体以上に達した.これらを元に,抗NAE抗体が既知の血清を用いて,電気泳動を用いる従来の方法と生物発光を用いるLIPS報の間での相関を検定していく.
2: おおむね順調に進展している
LIPS法による解析に必要なNAEとルシフェラーゼ融合蛋白を発現できる遺伝子の構築は完了し,免疫沈澱の条件設定の段階に達した.また,電気泳動を用いる従来法によって自己抗体(抗NAE抗体)が存在する血清も多数を得ることができた.
LIPS法に必要な融合蛋白を発現できる遺伝子を用いた免疫沈澱の条件設定によって抗NAE抗体の迅速測定法を開発する.LIPS法を用いた迅速測定によりNAEの抗原エピトープを絞り込む.
実験が順調に進み,物品費の使用が少なかったため.
物品費,人件費等で使用予定.
すべて 2016 2015
すべて 雑誌論文 (10件) (うち国際共著 1件、 査読あり 4件、 オープンアクセス 1件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (3件) (うち国際学会 2件、 招待講演 1件) 図書 (5件)
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