赤血球特異的ノックダウン法による貧血モデルマウスの作製

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K09447
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 藤原 亨 東北大学, 大学病院, 講師 (60333796)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 赤血球分化 / 貧血 / 転写因子

研究実績の概要

本研究においては、赤芽球分化に関わる転写因子群の機能解析に焦点をおき、テトラサイクリン発現誘導系を用いてマウス赤血球特異的にshRNAを効果的かつ可逆的に発現させる、in vivo遺伝子ノックダウン解析系を確立することを目指す。
平成29年度までに赤血球系の転写因子であるGATA-1プロモーター制御下にリバーステトラサイクリン制御性トランス活性化因子(rtTA)を発現させるトランスジェニックマウスを作製しており、rtTAが赤芽球に高発現している事を確認した。平成29年度はテトラサイクリン応答因子(TRE)制御下にLmo2特異的shRNAを発現させるトランスジェニックマウスを作成し、前者のマウスと掛け合わせることにより目的のマウス(Tg-EGFP-Lmo2 shRNA::Tg-G1HRD-rtTA)を作製した。現在なお、その形質を解析中である。
LMO2以外の赤血球系転写因子として、サラセミア、ポルフィリン症、Hereditary dyserythropoietic anemiaなどの様々な貧血関連疾患と深く関わるFOG1 (Friend of GATA-1)にも着目し、平成29年度中に機能解析を行った(Fujiwara et al. Biochemical and Biophysical Research Communications. 2017)。今後、本転写因子も赤血球系特異的ノックダウン系に利用する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] A defined culture method enabling the establishment of ring sideroblasts from induced pluripotent cells of X-linked sideroblastic anemia. (2018)
  • 著者名/発表者名: Hatta S, Fujiwara T, Yamamoto T, Saito K, Kamata M, Tamai Y, Kawamata S, Harigae H
  • 雑誌名: Haematologica 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.3324/haematol.2017.179770
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of a Screening System to Identify Novel GATA-2 Transcriptional Regulators (2018)
  • 著者名/発表者名: Ohashi K, Fujiwara T, Onodera K, Saito Y, Ichikawa S, Kobayashi M, Okitsu Y, Fukuhara N, Onishi Y, Harigae H.
  • 雑誌名: The Tohoku Journal of Experimental Medicine 巻: 244(1) ページ: 41-52
  • DOI: 10.1620/tjem.244.41
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Dynamics of absorption, metabolism, and excretion of 5-aminolevulinic acid in human intestinal Caco-2 cells (2017)
  • 著者名/発表者名: Saito K, Fujiwara T, Ota U, Hatta S, Ichikawa S, Kobayashi M, Okitsu Y, Fukuhara N, Onishi Y, Ishizuka M, Tanaka T, Harigae H
  • 雑誌名: Biochemistry and Biophysics Reports 巻: 11 ページ: 105-111
  • DOI: 10.1016/j.bbrep.2017.07.006
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of in vivo deletion of GATA2 in bone marrow stromal cells (2017)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa S, Fujiwara T, Okitsu Y, Kato H, Sato Y, Fukuhara N, Onishi Y, Shimizu R, Yamamoto M, Harigae H
  • 雑誌名: Experimental Hematology 巻: 56 ページ: 31-45
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2017.08.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel heterozygous ALAS2 mutation in a female with macrocytic sideroblastic anemia resembling myelodysplastic syndrome with ring sideroblasts: a case report and literature review. (2017)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara T, Fukuhara N, Ichikawa S, Kobayashi M, Okitsu Y, Onishi Y, Furuyama K, Harigae H
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 96(11) ページ: 1955-1957
  • DOI: 10.1007/s00277-017-3106-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Forced FOG1 expression in erythroleukemia cells: Induction of erythroid genes and repression of myelo-lymphoid transcription factor PU.1. (2017)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara T, Sasaki K, Saito K, Hatta S, Ichikawa S, Kobayashi M, Okitsu Y, Fukuhara N, Onishi Y, Harigae H.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 485(2) ページ: 380-387
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2017.02.068
  • 査読あり
• [雑誌論文] GATA transcription factors: basic principles and related human disorders. (2017)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara T
  • 雑誌名: The Tohoku Journal of Experimental Medicine 巻: 242(2) ページ: 83-91
  • DOI: 10.1620/tjem.242.83.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Impact of TET2 deficiency on iron metabolism in erythroblasts. (2017)
  • 著者名/発表者名: Inokura K, Fujiwara T, Saito K, Iino T, Hatta S, Okitsu Y, Fukuhara N, Onishi Y, Ishizawa K, Shimoda K, Harigae H.
  • 雑誌名: Experimental Hematology 巻: 49 ページ: 56-67
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2017.01.002
  • 査読あり
• [雑誌論文] An Lysophosphatidic Acid Receptors 1 and 3 Axis Governs Cellular Senescence of Mesenchymal Stromal Cells and Promotes Growth and Vascularization of Multiple Myeloma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kanehira M, Fujiwara T, Nakajima S, Okitsu Y, Onishi Y, Fukuhara N, Ichinohasama R, Okada Y, Harigae H.
  • 雑誌名: Stem Cells 巻: 35(3) ページ: 739-753
  • DOI: 10.1002/stem.2499
  • 査読あり
• [学会発表] Generation of Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Erythroblasts From A Patient With X-Linked Sideroblastic Anemia (2017)
  • 著者名/発表者名: Shunsuke Hatta, Tohru Fujiwara, Takako Yamamoto, Mayumi Kamata, Yoshiko Tamai, Yukiko Nakamura, Shin Kameoka, Hideo Harigae
  • 学会等名: Seventh Congress of the International Biolron Society
  • 国際学会
• [学会発表] Exploring the Mechanism of Fog1-Dependent Transcriptional Regulation in Erythroid Cells (2017)
  • 著者名/発表者名: Tohru Fujiwara, Katsuyuki Sasaki, Kei Saito, Shunsuke Hatta, Satoshi Ichikawa, Masahiro Kobayashi, Yoko Okitsu, Noriko Fukuhara, Yasushi Onishi, Hideo Harigae
  • 学会等名: European Hematology Association 22nd Congress
  • 国際学会
• [学会発表] ALAS2遺伝子変異を認めた大球性鉄芽球性貧血の一例 (2017)
  • 著者名/発表者名: 藤原亨、福原規子、猪俣美津恵、大西康、古山和道、張替秀郎
  • 学会等名: 第41回日本鉄バイオサイエンス学会学術集会
• [学会発表] Exploring the mechanism of FOG1-dependent transcriptional regulation in erythroid cells (2017)
  • 著者名/発表者名: Tohru Fujiwara, Katsuyuki Sasaki, Kei Saito, Shunsuke Hatta, Satoshi Ichikawa, Masahiro Kobayashi, Yoko Okitsu, Noriko Fukuhara, Yasushi Onishi, Hideo Harigae
  • 学会等名: 第79回日本血液学会学術集会
• [備考] 東北大学 血液・免疫病学分野
  • URL: http://www.rh.med.tohoku.ac.jp/index.html