血管老化におけるリポキシゲナーゼの細胞内局在制御システムの役割

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K09451
• 研究機関: 国立研究開発法人国立長寿医療研究センター
• 研究代表者: 勝見 章 国立研究開発法人国立長寿医療研究センター, 病院, 部長 (80378025)
• 研究分担者: 丸山 光生 国立研究開発法人国立長寿医療研究センター, その他部局等, 副所長 (00212225) ; 天野 睦紀 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (90304170)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: Rho / フォルミン / リポキシゲナーゼ

研究実績の概要

Rho GTPaseの新規エフェクター探索のため、我々はアフィニティクロマトグラフィーとそれに続くマススペクトロメトリー(LC/MS-MS)実験系を確立した。血小 板細胞質分画をアフィニティーカラム精製することで我々は活性型RhoAに特異的に結合する複数の蛋白を同定した。既知のRhoAエフェクター (mDia, PKN1, Rho kinase, IQGAP2, Daam1, Daam2)に加えて、アラキドン酸リポキシゲナーゼ-12(ALOX12)が活性型RhoA(RhoA-L63)に結合することが見いだされた。RhoAとALOX12を COS-1細胞内で発現したところ両者の直接の結合は認められなかった。一方でRhoAエフェクターDaam1とALOX12の結合がCOS-1細胞での発現実験で証明された。こ のことからALOX12はDaam1を介して活性型RhoAに結合することが判明した。さらにALOX12のLH2ドメインがDaam1のN末に結合することが明らかになった。Daam1と ALOX12の細胞内共局在を明らかにするとともに、RhoA下流阻害剤( Y-27632) を内因性のALOX12が発現した細胞に添加し、脂質メディエーター(ロイコトリエン、 リポキシン、HETEなど)の産生が抑制されるかどうかをELISAで検討した。

研究成果

• [雑誌論文] Apparent synonymous mutation F9 c.87A>G causes secretion failure by in-frame mutation with aberrant splicing. (2019)
  • 著者名/発表者名: Odaira K, Tamura S, Suzuki, N Kakihara M, Hattori Y, Tokoro M, Suzuki S, Takagi A, Katsumi A, Hayakawa F, Okamoto S, Suzuki A, Kanematsu T, Matsushita T, Kojima T.
  • 雑誌名: Thrombosis Research 巻: in press ページ: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular basis of SERPINC1 mutations in Japanese patients with antithrombin deficiency (2019)
  • 著者名/発表者名: Tamura Shogo、Hashimoto Erika、Suzuki Nobuaki、Kakihara Misaki、Odaira Koya、Hattori Yuna、Tokoro Mahiru、Suzuki Sachiko、Takagi Akira、Katsumi Akira、Hayakawa Fumihiko、Suzuki Atsuo、Okamoto Shuichi、Kanematsu Takeshi、Matsushita Tadashi、Kojima Tetsuhito
  • 雑誌名: Thrombosis Research 巻: 178 ページ: 159～170
  • DOI: https://doi.org/10.1016/j.thromres.2019.04.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rearrangement of VPS13B, a causative gene of Cohen syndrome, in a case of RUNX1?RUNX1T1 leukemia with t(8;12;21) (2018)
  • 著者名/発表者名: Abe Akihiro、Yamamoto Yukiya、Katsumi Akira、Okamoto Akinao、Tokuda Masutaka、Inaguma Yoko、Yamamoto Kiyoko、Yanada Masamitsu、Kanie Tadaharu、Tomita Akihiro、Akatsuka Yoshiki、Okamoto Masataka、Kameyama Toshiki、Mayeda Akila、Emi Nobuhiko
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 108 ページ: 208～212
  • DOI: https://doi.org/10.1007/s12185-017-2387-x
  • 査読あり
• [学会発表] 臨床研究DBシステムD☆Dを用いた静脈血栓塞栓症の発症率推計 (2018)
  • 著者名/発表者名: 勝見章，渡辺浩，松下正，小嶋哲人
  • 学会等名: 第60回日本老年医学会学術集会
• [学会発表] 臨床研究DBシステムD☆Dを用いた静脈血栓塞栓症の発症率推計 (2018)
  • 著者名/発表者名: 勝見章，渡辺浩，松下正，小嶋哲人
  • 学会等名: 第40回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] Many of the prothrombin mutations in the sodium-binding region cause an antithrombin-resistance phenotype (2018)
  • 著者名/発表者名: Shogo Tamura, Moe Murata-Kawakami, Yuki Takagi, Sachiko Suzuki, Akira Katsumi, Akira Takagi, Tetsuhito Kojima
  • 学会等名: The 10th Congress of the Asian-Pacific Society on Thrombosis and Hemostasis
  • 国際学会
• [学会発表] Prevalence of venous thromboembolism (VTE) in a single institute (2018)
  • 著者名/発表者名: Akira Katsumi, Seara Ikeno, Hiroshi Watanabe, Tadashi Matsushita, Tetsuhito Kojima
  • 学会等名: 第80回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Efficacy of Eculizumab for aplastic anemia developed to paroximal nocturnal hemogrobinuria after IST (2018)
  • 著者名/発表者名: Seara Ikeno, Motohito Okabe, Yuka Kawaguchi, Marie Ohbiki, Yoonha Lee, Masahide Osaki, Miyo Goto, Hiroaki Araie, Takahiko Sato, Takanobu Morishita, Yukiyasu Ozawa, Akira Katsumi, Koichi Miyamura
  • 学会等名: 第80回日本血液学会学術集会
• [図書] 日本臨牀76巻7 (2018 年8 月) 老年医学 XI．高齢者の臓器別疾患 悪性リンパ腫 (2018)
  • 著者名/発表者名: 池野世新、勝見 章
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: 日本臨床社