研究課題
骨髄線維症の予後は不良であり、新規治療法の開発が切望されている。原発性骨髄線維症で約3割の患者に変異が認められるCalreticulin(CALR)について、野生型CALRの正常造血における役割、変異型CALRのMPN発症における役割を明らかにするため、以下の2つテーマについて研究を進めている。1)変異CALRのin vitro機能解析:巨核球の形質を有する細胞株の中から、MPLを発現している細胞株をスクリーニングし4種類の株について、CRISPR/Cas9システムによりヒトと相同的なCALR変異のノックインを試み、CMK11-5、 F36P-MPLの2種類について成功した。CALR変異導入CMK11-5細胞では、細胞増殖、トロンボポエチン感受性の亢進が認められた。2)正常CALR及び変異CALRのin vivo機能解析:CALR遺伝子のfloxマウス, KOマウスと血球特異的Cre-recombinaseを誘導できるMx-Creマウスを交配し、Mx-Cre, CALRflox/-マウスを作成した。この二重変異マウスではpIpCを投与により、血球特異的なCALR発現欠損が認められた。また、野生型マウス骨髄細胞にCALRの変異体を導入し成体マウスに移植したところ、血小板増多が認められ、骨髄移植モデルの作成に成功した。
2: おおむね順調に進展している
2つのテーマのうち, 後者については血球特異的CALR欠損マウスの作成に成功したことから、正常造血における野生型CALRの機能をin vivoで明らかにできると考えている。変異CALRの機能解析についても、導入血球細胞株、導入マウスモデルが作成できたことより、これらを用いた解析が次年度以降可能となる。
組換えマウスの繁殖スペース、レトロウイルスベクターの遺伝子導入効率など、平成27度で明らかになった課題を解決する方策を講じ、平成28度の研究計画に生かして計画を速やかに遂行するべく努力する。平成28年度内に本研究の成果の論文として公表することを目指す。
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すべて 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 3件、 査読あり 3件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (1件)
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