同種骨髄移植後の新規免疫モニタリングシステムと免疫寛容メカニズムの解明

2015 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 15K09493
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 錦井 秀和 筑波大学, 医学医療系, 助教 (30512834)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 移植片対宿主病 / 制御性T細胞 / TNFRSF25

研究実績の概要

平成27年度は、マウス同種移植モデルを用いてTNFRSF25-agonistic抗体を用いた急性GVHDにおけるTNFRSF25シグナルの役割に重点をおいて研究を行った。
①ドナーマウスにTNFRSF25抗体を投与した後、T細胞を脾臓・リンパ節・末梢血より採取すると、CD4+Foxp3+制御性T細胞の頻度が有意に上昇した。②Muticolor FACS及びCyTOFでTNFRSF25抗体刺激後のT細胞及び他の免疫細胞を解析すると、CD4+Foxp3+CD44+CD62L+Ki67+のCentral Memory typeの制御性T細胞が有意に増加しており、他のT細胞プールをはじめとした免疫細胞への変化は少なかった③TNFRSF25抗体により刺激したドナーT細胞をT細胞除去骨髄(TCD-BM)を同時に致死量放射線照射後のMHC不一致マウスへ投与した所、抗体非投与群は急性GVHDを発症し死亡したが、抗体投与群ではドナーT細胞の増殖抑制、炎症性サイトカインの産生抑制、腸管・肝臓へのドナーT細胞の浸潤抑制が認められ、急性GVHDの発症が抑制された④マウスB細胞腫瘍であるA20細胞をマウスに投与した担癌マウスを用いて、③と同様に骨髄移植を行った所、抗体投与群では急性GVHDの発症がよく際される一方、A20細胞は消失した。すなわちTNFRSF25抗体刺激後のT細胞はGVT(Graft versus Tumor)効果を担保しつつ、GVHDを抑制できる事が明らかとなった。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

患者検体の解析については進行できていない。
CYTOFについては10-15 color FACSと比較し解像度が劣る傾向にあるため、現在はマウスによる解析で再現性を取る事を優先している。マウスのモデルに関しては興味深いデータが出ており、モニタリングとしての研究のみならず、治療モデルとしての提案も検討している。

今後の研究の推進方策

15colorによるFACSデータを網羅的に解析するシステムについては、安定した結果が得られておりこれらの経時的観察をまず優先する。ヒト検体を用いた解析については臨床データベースとFACSデータを収集中である。
マウス治療モデルに関しては、前年度と異なる実験モデルも検討しており、TNFRSF25シグナルの急性GVHD発症における役割を更に明らかにする予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Regulatory T cell Immunotherapy in Immune-Mediated Disease. (2015)
  • 著者名/発表者名: Pierini A, Schneidawind D, Nishikii H (Co first), Negrin RS.
  • 雑誌名: Current Stem Cell Report 巻: 1 ページ: 177-186
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Treatment with agonistic DR3 antibody results in expansion of donor Tregs and reduced graft-versus-host disease. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kim BS, Nishikii H(Co first), Baker J, Pierini A, Schneidawind D, Pan Y, Beilhack A, Park CG, Negrin RS
  • 雑誌名: Blood 巻: 126 ページ: 546-557
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Engraftment of Embryonic Stem Cells and Differentiated Progeny by Host Conditioning with Total Lymphoid Irradiation and Regulatory T Cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Pan Y, Leverson-Gower DB, De Almeida PE, Pierini A, Baker J, Florek M, Nishikii H, Kim BS, Ke R, Wu JC, Negrin RS
  • 雑誌名: Cell Reports 巻: 10 ページ: 1793-1802
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Donor requierements for regulatory T cell suppression of murine graft-versus-host disease. (2015)
  • 著者名/発表者名: 3.Pierini A, Colonna L, Alvarez M, Schneidawind D, Nishikii H, BakerJ, Pan Y, Florek M, Kim BS, Negrin RS
  • 雑誌名: Journal of Immunology 巻: 195 ページ: 347-355
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] Expanded CD4+Foxp3+ regulatory T cells through DR3 signaling showed distinct immunophenotype and prevented the lethal acute-graft and host disease after allogeneic transplantation. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hidekazu Nishikii, Byung Su Kim, Antonio Pierini, Jeanette Baker, Yasuhisa Yokoyama, Dominik Schneidawind, Yuqiong Pan, Maite Alvarez, Yan Chen, Shigeru Chiba, Robert S. Negrin
  • 学会等名: ASH annual meeting 2015
  • 発表場所: 米国 オーランド
  • 年月日: 2015-12-05
  • 国際学会