細胞内亜鉛制御による関節リウマチの新規治療戦略の確立

2015 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 15K09521
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 池田 啓 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (10456014)
• 研究分担者: 中島 裕史 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00322024) ; 須藤 明 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任准教授 (50447306)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 関節リウマチ / 亜鉛 / ヘルパーT細胞

研究実績の概要

1. マウス関節炎モデルに関しては、野生型マウスにおけるコラーゲン誘導性関節炎（CIA）の系が安定した。また、足関節軟骨・滑膜・リンパ節のmRNA抽出のセットアップが終了し、免疫組織染色、ならびにFluoZin-3によるZn2+濃度の解析はセットアップ中である。軟骨特異的ZIP8トランスジェニックマウス（Col2A1-Zip8 TG）は交配により個体数が確保され、CIAの予備実験を開始するとともに、軟骨特異的MTF1欠損マウス（Col2A1 Cre-Mtf1 KO）の交配を開始した。軟骨特異的MT-1/2欠損マウス（Col2A1 Cre-Mt KO）ならびにT細胞特異的MT-1/2欠損マウス（CD4 Cre-Mt KO）を作成準備中である。
2. 野生型マウス脾細胞よりナイーヴCD4陽性T細胞を単離し、Th0/Th17/Treg条件下で培養した際、Th17分化において複数の亜鉛トランスポーター（ZNT1-10、ZIP1-14）の発現が増強されることを見出し、その確認、経時的変化、ならびに細胞内Zn2+濃度変化との関連を解析中である。また、MT-1/2のノックダウンベクターを作成済みである。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

CIAの発症率および発症までの期間が安定せず、試薬の変更などにより系が安定するまでに時間を要した。

今後の研究の推進方策

CIA発症後の組織における亜鉛関連遺伝子発現には変動が認められ、関節炎病態における亜鉛制御機構の関与が示唆される。セットアップに時間は要したが、計画通りで研究を遂行したい。

次年度使用額が生じた理由

マウス関節炎モデルとその解析のセットアップに時間を要し、本年度実施計画の一部が次年度実施予定となったため。

次年度使用額の使用計画

Th17分化における亜鉛濃度制御に重要な亜鉛トランスポーターZNT/ZIPを絞り込み、MTとともにベクターの作成・マウスの作成を進め、それらの関節炎病態における役割を明らかとする。

研究成果

• [雑誌論文] Helios Enhances Treg Cell Function in Cooperation With FoxP3 (2015)
  • 著者名/発表者名: Takatori H, Kawashima H, Matsuki A, Meguro K, Tanaka S, Iwamoto T, Sanayama Y, Nishikawa N, Tamachi T, Ikeda K, Suto A, Suzuki K, Kagami S, Hirose K, Kubo M, Hori S, Nakajima H
  • 雑誌名: Arthritis Rheumatol 巻: 67 ページ: 1491-502
  • DOI: 10.1002/art.39091
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of Bcl-3 in the development of follicular helper T cells and in the pathogenesis of rheumatoid arthritis (2015)
  • 著者名/発表者名: Meguro K, Suzuki K, Hosokawa J, Sanayama Y, Tanaka S, Furuta S, Ikeda K, Takatori H, Suto A, Sakamoto A, Ohara O, Nakajima H
  • 雑誌名: Arthritis Rheumatol 巻: 67 ページ: 2651-60
  • DOI: 10.1002/art.39266
  • 査読あり