関節リウマチの新しい予防・治療法確立への挑戦

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K09522
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 小澤 龍彦 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 助教 (10432105)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: モノクローナルACPA / 関節リウマチ / シトルリン化 / ISAAC法 / フィブリノーゲン

研究実績の概要

天然アミノ酸であるシトルリンを含む環状ペプチド(cyclic citrullinated peptide; CCP)に対する抗体(anti-citrullinated protein antibodies; ACPA) は、関節リウマチ(RA)患者に特異的に出現する自己抗体である。その自己抗原を同定することでACPAの誘導メカニズムやRAとの病態を考察する研究が進められている。本研究では、我々が単離したシトルリン化ペプチドcfc1-cyc と結合するRA患者由来モノクローナルACPA(CCP-Ab1)を用いて、その抗原の同定を進めた。
平成29年度は、実施した質量分析にて見出された候補抗原の検証を行った。その結果、CCP-Ab1は非変性状態のフィブリノーゲンと結合し、変性状態のフィブリノーゲンとは結合しないことが示された。
CCP-Ab1がどのように誘導されたのかを考察するために、CCP-Ab1のアミノ酸配列を、体細胞突然変異が起こる前の生殖細胞のアミノ酸配列に戻し、cfc1-cyc及びフィブリノーゲンとの結合性を確認した。生殖細胞のアミノ酸配列に戻したCCP-Ab1はcfc1-cycと結合するが、フィブリノーゲンとは結合しないことが示された。
CCP-Ab1は多数の変性タンパク質と結合することが示されており、さらに非変性状態のフィブリノーゲンとも結合することが示された。本研究より、変性タンパク質の刺激よってB細胞の成熟が進み、体細胞突然変異が起こることでフィブリノーゲンとも偶発的に結合する能力を獲得したと示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Ligand-activated epidermal growth factor receptor (EGFR) signaling governs endocytic trafficking of unliganded receptor monomers by non-canonical phosphorylation (2018)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T, Zhou Y, Ozawa T, Okizono R, Banba A, Yamamura T, Oga E, Muraguchi A, Sakurai H
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 293 ページ: 2288-2301
  • DOI: 10.1074/jbc.M117.811299
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of tumor-associated antigen-reactive T cell receptor with tumoricidal activity by single-cell repertoire analysis of tumor-infiltrating lymphocytes (2018)
  • 著者名/発表者名: Shitaoka K, Hamana H, Kishi H, Hayakawa Y, Kobayashi E, Sukegawa K, Piao X, Lyu F, Nagata T, Sugiyama D, Nishikawa H, Tanemura A, Katayama I, Murahashi M, Takamatsu Y, Tani K, Ozawa T, Muraguchi A
  • 雑誌名: Cancer Immunol Res 巻: 6 ページ: 378-388
  • DOI: 10.1158/2326-6066.CIR-17-0489
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cisplatin-induced non-canonical endocytosis of EGFR via p38 phosphorylation of the C-terminal region containing Ser-1015 in non-small cell lung cancer cells (2018)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T, Ozawa T, Oga E, Muraguchi A, Sakurai H
  • 雑誌名: Oncol Lett 巻: in press ページ: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Surveillance Study of Influenza Occurrence and Immunity in a Wisconsin Cohort During the 2009 Pandemic (2017)
  • 著者名/発表者名: Lo CY, Strobl SL, Dunham K, Wang W, Stewart L, Misplon JA, Garcia M, Gao J, Ozawa T, Price GE, Navidad J, Gradus S, Bhattacharyya S, Viboud C, Eichelberger MC, Weiss CD, Gorski J, Epstein SL
  • 雑誌名: Open Forum Infect Dis 巻: 4 ページ: 1395～1406.e10
  • DOI: 10.1093/ofid/ofx023
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Association Between High-Avidity T-Cell Receptors, Induced by alpha-Fetoprotein-Derived Peptides and Anti-Tumor Effects in Patients With Hepatocellular Carcinoma (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa H, Mizukoshi E, Kobayashi E, Tamai T, Hamana H, Ozawa T, Kishi H, Kitahara M, Yamashita T, Arai K, Terashima T, Iida N, Fushimi K, Muraguchi A, Kaneko S
  • 雑誌名: Gastroenterology 巻: 152 ページ: 1395-1406.e10
  • DOI: 10.1053/j.gastro.2017.02.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of an HLA class I allele closely involved in the autoantigen presentation in acquired aplastic anemia (2017)
  • 著者名/発表者名: Zaimoku Y, Takamatsu H, Hosomichi K, Ozawa T, Nakagawa N, Imi T, Maruyama H, Katagiri T, Kishi H, Tajima A, Muraguchi A, Kashiwase K, Nakao S
  • 雑誌名: Blood 巻: 129 ページ: 2908-2916
  • DOI: 10.1182/blood-2016-11-752378
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of novel epitopes with agonistic activity for the development of tumor immunotherapy targeting TRAIL-R1 (2017)
  • 著者名/発表者名: Guo L, Sun X, Hao Z, Huang J, Han, You Y, Li Yaying, Shen M, Ozawa T, Kishi H, Muraguchi A, Jin A
  • 雑誌名: J Cancer 巻: 8 ページ: 2542-2553
  • DOI: 10.7150/jca.19918
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] 関節リウマチ患者由来自己抗体が認識する非変性状態の抗原の同定と自己抗体誘導仮説 (2017)
  • 著者名/発表者名: 小澤 龍彦、津田玲奈、浜名洋、小林栄治、多喜博文、戸邊一之、村口 篤、岸 裕幸
  • 学会等名: 2017年度生命科学系学会合同年次大会
• [学会発表] Evolution of anti-citrullinated peptide antibody (ACPA): analysis of autoantigen under native condition using a human monoclonal ACPA (2017)
  • 著者名/発表者名: Ozawa T, Tsuda R, Hamana H, Kobayashi E, Taki H, Tobe K, Muraguchi A, Kishi H.
  • 学会等名: 第46回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] The model of antigen detection system using yeast surface display library (2017)
  • 著者名/発表者名: Ohnuki Y, Ozawa T, Hamana H, Kobayashi E, Lyu F, Muraguchi A, Kishi H
  • 学会等名: 第46回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] A novel method for the production of recombinant MHC/peptide complexes (2017)
  • 著者名/発表者名: Lyu F, Ozawa T, Hamana H, Kobayashi E, Muraguchi A, Kishi H
  • 学会等名: 第46回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Majority of tumor infiltrating lymphocytes in B16F10 melanoma recognized tumor-associated antigens,but not melanoma-associated antigens or neoantigens (2017)
  • 著者名/発表者名: Shitaoka K, Hamana H, Kobayashi E, Ozawa T, Hayakawa Y, Muraguchi A, Kishi H
  • 学会等名: 第46回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] T cell receptor (TCR) gene cloning from tumor infiltrating lymphocytes of breast cancer patients towardTCR gene therapy (2017)
  • 著者名/発表者名: Hamana H, Nagata T, Shitaoka K, Sukegawa K, Ozawa T, Kobayashi E, Muraguchi A, Kishi H
  • 学会等名: 第46回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] TCR repertoire analysis of antigen-specific T cells using immunospot array assay on a chip (T-ISAAC) technology (2017)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi E, Ozawa T, Hamana H, Lyu F, Muraguchi A, Kishi H
  • 学会等名: 第46回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Production of Ro52/TRIM21 autoantibodies that react to PEP08 epitope in Ro52 clinically relate to themorbidity and severity of interstitial lung disease in connective tissue diseases (2017)
  • 著者名/発表者名: Okumura M, Ozawa T, Taki H, Muraguchi A, Kishi H
  • 学会等名: 第46回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] 自己免疫性出血病XIII/13症例より作製したヒト単クローン抗体のエピトープ解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 尾崎 司、惣宇利 正善、小澤 龍彦、村口 篤、一瀬 白帝
  • 学会等名: 2017年度生命科学系学会合同年次大会
• [学会発表] 乳がん浸潤リンパ球の迅速・簡便TCRレパートリー解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 浜名 洋、長田 拓哉、下岡 清美、祐川 健太、小澤 龍彦、村口 篤、岸 裕幸
  • 学会等名: 第22回がん免疫学会総会
• [学会発表] Novel Human Anti-HLA-Bw4 and B61 Monoclonal Antibodies Kill Malignant B Cells Via CDC/ADCC While Sparing Normal Peripheral Blood Cells (2017)
  • 著者名/発表者名: Takamatsu H, Ozawa T, Zaimoku Y, Tsuji A, Hanamura I, Kuroda J, Tanaka H, Kawai S, Kishi H, Nakao S.
  • 学会等名: ASH the 59th Annual Meeting and Exposition
  • 国際学会
• [学会発表] p38活性化はEGFR Ser-1015のリン酸化を介したエンドサイトーシスを誘導する (2017)
  • 著者名/発表者名: 大賀 英司、田中 智大、小澤 龍彦、村口 篤、櫻井 宏明
  • 学会等名: 2017年度生命科学系学会合同年次大会