2017 年度実施状況報告書

乾癬病態形成の可視化を通した創薬基盤の形成

研究課題

研究課題/領域番号	15K09766
研究機関	京都大学
研究代表者	本田哲也京都大学, 医学研究科, 講師 (40452338)
研究期間 (年度)	2015-04-01 – 2019-03-31
キーワード	乾癬 / トロンボキサン / ガンマデルタT細胞
研究実績の概要	乾癬発症に必須であるIL-17の産生制御メカニズムについて、マウス乾癬モデルにライブイメージングの手法を組み合わせることで解析した。マウス乾癬モデルとして、イミキモド誘発乾癬モデルを用いた。皮膚でのIL-17産生の経時的変化を検討したところ、イミキモド外用3日目にピークを迎え、以後ほぼ横ばいで推移した。同モデルでは、gamma delta T細胞が、樹状細胞からのIL-23刺激をうけてIL-17を産生する。従って、皮膚樹状細胞とgamma delta T細胞の動態と相互作用についてそれぞれのレポーターマウスを組み合わせてライブイメージングにより観察した。皮膚樹状細胞とgamma delta T細胞は、皮膚で頻繁な相互作用をしている様子が認められた。このことから、樹状細胞がgamma delta T細胞を引き寄せる因子を放出している可能性を考え、インビトロにおいて樹状細胞とgamma delta T細胞を使ったケモタキシスアッセイを行った。その結果、樹状細胞からの何らかの液性因子が、gamma delta T細胞の遊走を促進している可能性が示唆された。樹状細胞からの因子として、脂質メディエーターの関与に仮説をたてた。gamma elta T細胞の活性因子としてトロンボキサン、遊走因子としてロイコトリエンを同定した。皮膚樹状細胞はgamma delta T細胞と物理的に近傍に存在することで、gamma delta T細胞の活性を誘導しやすい状態にあること、また樹状細胞からのトロンボキサンが、乾癬モデルにおけるIL-17産生を促進していることを証明した。またロイコトリエンがgamma delta T細胞の遊走、樹状細胞との相互作用を制御している可能性が示唆された。
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 2: おおむね順調に進展している理由予定された実験はほぼ順調に遂行された。さらに、樹状細胞から産生される、gamma delta T細胞機能制御の候補因子としてトロンボキサンを見出し、報告した。またgamma delta T細胞の遊走制御因子としてロイコトリエンを同定し、現在その詳細な解析をすすめている。
今後の研究の推進方策	gamma delta T細胞の遊走因子としてin vitroの解析にてロイコトリエンを同定した。今後は、この作用についてin vivoで同様の現象がどの程度生じているかを検証し、また乾癬病態形成への寄与について、検証を進める予定である。
次年度使用額が生じた理由	乾癬病態形成に重要であるガンマデルタT細胞の活性・遊走の制御因子として、それぞれトロンボキサン、ロイコトリエンを同定した。トロンボキサンの機能については解析を終了し報告することができたが、ロイコトリエンの機能解析については予想以上の時間を有した。次年度中には解析を終了し、報告予定である。