遺伝性乳癌のスプライシング改変による新たな治療法をめざす

2015 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 15K10050
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 大江 賢治 京都大学, 学内共同利用施設等, 講師 (30419527)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 遺伝性乳癌 / スプライシング

研究実績の概要

BRCA1 5382insC変異は、多くの乳癌・卵巣癌において認められる。この変異を内在性にもつHCC1937細胞において、変異の存在するエキソン20をスキップさせることができれば、コドンのフレームを修正でき、治療につながると考えられる。スプライシング是正化合物のTG003,SRPIN340添加によるエクソン・スキップ誘導を試みたが、エキソン20のスキップを認めなかった。エキソン・スキップを確実に行うため、スプライス・スイッチ・オリゴの使用を検討している。TG003は、exon 20のスキップを認めなかったが、mRNAレベルにおいてBRCA1の発現の上昇を認めた。この現象は、分化したC2C12筋肉細胞のRNA-seqデータにおいても認められ、スプライシングよりもBRCA1遺伝子の転写量に関係している可能性がある。TG003はSR蛋白質のリン酸化を阻害するが、SR蛋白質が転写や3’末端プロセッシングを制御する報告があり、この原因を追究している。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

代表的なスプライシング是正化合物TG003やSRPIN340では、エキソン・スキッピングを認めなかった。当初の計画では、この場合、新たなスプライシング是正化合物をスクリーニング予定であったが、より確実で特異性の高いスプライス・スイッチ・オリゴの使用を検討している。

今後の研究の推進方策

スプライス・スイッチ・オリゴによるBRCA1 5382insC変異を認めるエキソン20のスキップを試みて、BRCA1蛋白質の発現への影響、HCC1937細胞の癌増殖進展に対する影響を検討する。また、TG003がBRCA1のスプライシング以外の段階で発現を調節している可能性がある、という興味深い結果を得たので、他の乳癌細胞への影響を調べ報告したいと考えている。

研究成果

• [雑誌論文] Modulation of alternative splicing with chemical compounds in new therapeutics for human diseases. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ohe K, Hagiwara M.
  • 雑誌名: ACS chemical biology 巻: 10 ページ: 914-924
  • DOI: 10.1021/cb500697f
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of a gene associated with autosomal dominant late-onset Parkinson's disease: a genome-wide linkage and sequencing study. (2015)
  • 著者名/発表者名: Funayama M, Ohe K, Amo T, Furuya N, Yamaguchi J, Saiki S, Li Y, Ogaki K, Ando M, Yoshino H, Tomiyama H, Nishioka K, Hasegawa K, Saiki H, Satake W, Mogushi K, Sasaki R, Kokubo Y, Kuzuhara S, Toda T, Mizuno Y, Uchiyama Y, Ohno K, Hattori N.
  • 雑誌名: The Lancet Neurology 巻: 14 ページ: 274-282
  • DOI: 10.1016/S1474-4422(14)70266-2
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rectifier of aberrant mRNA splicing recovers tRNA modification in familial dysautonomia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshida M, Kataoka N, Miyauchi K, Ohe K,Iida K, Yoshida S, Nojima T, Okuno Y, Onogi H, Usui T, Takeuchi A, Hosoya T, Suzuki T, Hagiwara M.
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 巻: 112 ページ: 2764-2769
  • DOI: 10.1073/pnas.1415525112
  • 査読あり
• [学会発表] Identification of RNA-binding proteins responsible for aberrant tissue-specific splicing of the IKBKAP gene in Familial dysautonomia (2015)
  • 著者名/発表者名: Kenji Ohe, Mayumi Yoshida, Akiko Nakano-Kobayashi, Kensuke Ninomiya, Maki Sakuma, Tomomi Usui, Takayuki Nojima, Naoyuki Kataoka, Masatoshi Hagiwara
  • 学会等名: EUKARYOTIC mRNA PROCESSING meeting 2015, Cold Spring Harbor Laboratory
  • 発表場所: New York, USA
  • 年月日: 2015-08-18 – 2015-08-22
  • 国際学会
• [学会発表] Identification of RNA-binding proteins responsible for aberrant tissue-specific splicing of the IKBKAP gene in Familial dysautonomia (2015)
  • 著者名/発表者名: Kenji Ohe, Mayumi Yoshida, Akiko Nakano-Kobayashi, Kensuke Ninomiya, Maki Sakuma, Tomomi Usui, Takayuki Nojima, Naoyuki Kataoka, Masatoshi Hagiwara
  • 学会等名: 第17 回日本RNA 学会年会
  • 発表場所: 札幌市、北海道
  • 年月日: 2015-07-15 – 2015-07-17
• [図書] 選択的スプライシング・ネットワークを化合物で操作する 生体の科学 特集「細胞を化学で観察する・操作する」 (2015)
  • 著者名/発表者名: 大江賢治、萩原正敏
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: 金原一郎医学医療振興財団
• [図書] スプライシング 生体の科学 特集 細胞シグナル操作法 II. 機能からみたシグナル操作法 (2015)
  • 著者名/発表者名: 大江賢治、飯田慶、萩原正敏
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 金原一郎医学医療振興財団