形質転換と階層的複製能よりみた治療抵抗性肝癌に対する個別化治療についての研究

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 15K10162
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 永野 浩昭 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10294050)
• 研究分担者: 和田 浩志 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (00572554) ; 浅岡 忠史 大阪大学, 医学部附属病院, 助教 (60528470) ; 江口 英利 大阪大学, 医学系研究科, 准教授 (90542118)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 肝細胞癌 / 治療抵抗性 / 形質転換 / 癌幹細胞 / 個別化治療

研究実績の概要

本研究では、現在までに施行してきた約500例の既存治療無効進行肝癌に対する治療経験とこれらの肝切除標本を含む臨床検体をもとに、この既存治療無効病巣の生物学的特性を、“上皮間葉系形質転換”と癌幹細胞に特異的な“階層的複製能”の点より明らかにする。この着目点については、肝細胞癌の既存治療抵抗性病巣が、RFAやTACEなどの反復局所治療の結果、出現することによる。つまり、これら既存治療は壊死効果により抗腫瘍効果を得るため低酸素状況を作りだし、そのことが一部の癌細胞の形質転換を誘発しそのため癌幹細胞様の治療抵抗性癌細胞の出現を助長し、最終的に抵抗性を獲得する可能性が高い。
現在までにわれわれは、癌細胞の形質転換と癌幹細胞様の階層的複製能についての基礎的研究をすでに幹細胞癌で進行中であり、特に既存治療抵抗性病巣の特徴を、“上皮間葉系形質転換”との関係より解明しつつある。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

既存治療抵抗性肝癌については、従来のTACE、RFAなどの肝癌局所療法を反復施行することにより、低酸素状況を誘発することが知られている。さらに、既存治療抵抗性病巣の典型例である門脈内腫瘍栓切除症例の臨床検体を対象として、低酸素状況については、上皮間葉系形質転換誘発との関係について、E-CAD、N-CAD、VIMENTIN、SNAIL、FIBRINECTINなどの種々の上皮・間葉系マーカーの発現について明らかにした。加えて、癌幹細胞マーカーであるCD13の発言との関係についても明らかにした。

今後の研究の推進方策

既存治療抵抗性肝癌の臨床検体を用いた癌幹細胞に関する検討
上記①において、低酸素状況より誘発される上皮間葉系形質転換を示した癌細胞は、他の消化器癌においては、癌幹細胞に特有の階層的複製能を有すると考えられている。この点について、肝細胞癌においても、既存治療抵抗性病巣における癌幹細胞様の変化について、CD13、などの肝癌特異的な癌幹細胞マーカーの発現について確認したことより、今後癌幹細胞との関連について、さらに検討する。

肝癌不応答株を用いた獲得耐性に関する検討
現在までに、肝癌細胞株を用いたIFN不応答株を作成してきた。同様の手法を用いて、5FU、CDDP、ソラフェニブに対する不応答株を順次作成し、クローニングする。これらの不応答株は、先述した既存治療抵抗性肝癌に治療に対する治療として次に考えられる抗悪性腫瘍剤治療については、薬剤不応答性の機序について検討する必要がある。まず、これらの不応答株について親株を対象とし、トランスクリプトーム、miRNAの両方より、オミクス解析を行い、これら不応答性に関与する遺伝子とmiRNAについて探索するとともに、現在の勤務地である山口大学消化器・腫瘍外科学講座にすでに設置されている次世代シークエンサーを用いた解析に着手する。

次年度使用額が生じた理由

本年度の実験のおいて、細胞培養のための、培地シャーレ、培地の購入費を計上していたが研究が順調に進んだことにより、予定より低額に抑えられたため、未使用額が生じた。

次年度使用額の使用計画

未使用額については、平成29年度の学会への旅費、参加費、打ち合わせ等に係る旅費と併せて使用する。

研究成果

• [雑誌論文] A crucial epithelial to mesenchymal transition regulator, Sox4/Ezh2 axis is closely related to the clinical outcome in pancreatic cancer patients (2016)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa S, Nagano H, Konno M, Eguchi H, Tomokuni A, Tomimaru Y, Asaoka T, Wada H, Hama N, Kawamoto K, Marubashi S, Nishida N, Koseki J, Mori M, Doki Y, Ishii H
  • 雑誌名: Int J Oncol 巻: 48(1) ページ: 145-152
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Pre-treatment neutrophil to lymphocyte ratio as a predictive marker for pathological response to preoperative chemoradiotherapy in pancreatic cancer (2016)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa S, Eguchi H, Tomokuni A, Tomimaru Y, Asaoka T, Wada H, Hama N, Kawamoto K, Kobayashi S, Marubashi S, Konno M, Ishii H, Mori M, Doki Y, Nagano H
  • 雑誌名: Oncology Letters 巻: 11(2) ページ: 1560-1566
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Platelet count is more useful for predicting posthepatectomy liver failure at surgery for hepatocellular carcinoma than indocyanine green clearance test (2016)
  • 著者名/発表者名: Tomimaru Y, Eguchi H, Gotoh K, Kawamoto K, Wada H, Asaoka T, Noda T, Yamada D, Ogawa H, Umeshita K, Nagano H, Doki Y, Mori M
  • 雑誌名: J Surg Oncol 巻: 113(5) ページ: 565-569
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The Clinical Impact of Transcatheter Arterial Chemoembolization (TACE)-Induced c-Met Upregulation on TACE Refractoriness in Hepatocellular Carcinoma (2016)
  • 著者名/発表者名: Kajihara J, Tomimaru Y, Eguchi H, Yamada D, Wada H, Tomokuni A, Asaoka T, Kawamoto K, Marubashi S, Nagano H, Umeshita K, Doki Y, Mori M
  • 雑誌名: Dig Dis Sci 巻: 61(6) ページ: 1572-1581
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A Histone Deacetylase Inhibitor Suppresses Epithelial-Mesenchymal Transition and Attenuates Chemoresistance in Biliary Tract Cancer (2016)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto T, Kobayashi S, Yamada D, Nagano H, Tomokuni A, Tomimaru Y, Noda T, Gotoh K, Asaoka T, Wada H, Kawamoto K, Marubashi S, Eguchi H, Doki Y, Mori M
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 11(1) ページ: e0145985
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Specific increase in serum core-fucosylated haptoglobin in patients with chronic pancreatitis (2016)
  • 著者名/発表者名: Ueda M, Kamada Y, Takamatsu S, Shimomura M, Maekawa T, Sobajima T, Fujii H, Nakayama K, Nishino K, Yamada M, Kobayashi Y, Kumada T, Ito T, Eguchi H, Nagano H, Miyoshi E
  • 雑誌名: Pancreatology 巻: 16(2) ページ: 238-243
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Serum Mac-2 binding protein is a novel biomarker for chronic pancreatitis (2016)
  • 著者名/発表者名: Maekawa T, Kamada Y, Ebisutani Y, Ueda M, Hata T, Kawamoto K, Takamatsu S, Mizutani K, Shimomura M, Sobajima T, Fujii H, Nakayama K, Nishino K, Yamada M, Kumada T, Ito T, Eguchi H, Nagano H, Miyoshi E
  • 雑誌名: World J Gastroenterol 巻: 22(17) ページ: 4403-4410
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Efficacy and Safety of Biweekly Docetaxel in Combination with Nedaplatin as Second-line Chemotherapy for Unresectable or Recurrent Esophageal Cancer (2016)
  • 著者名/発表者名: Kanekiyo S, Takeda S, Nakajima M, Nishiyama M, Kitahara M, Shindou Y, Michihisa I, Abe T, Yoshino S, Hazama S, Nagano H
  • 雑誌名: Anticancer Res 巻: 36(4) ページ: 1923-1927
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Combined adjuvants of poly(I:C) plus LAG-3-Ig improve antitumor effects of tumor-specific T cells, preventing their exhaustion (2016)
  • 著者名/発表者名: Kano Y, Iguchi T, Matsui H, Adachi K, Sakoda Y, Miyakawa T, Doi S, Hazama S, Nagano H, Ueyama Y, Tamada K
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 107(4) ページ: 398-406
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Selection criteria for hepatic resection in intermediate-stage (BCLC stage B) multiple hepatocellular carcinoma (2016)
  • 著者名/発表者名: Wada H, Eguchi H, Noda T, Ogawa H, Yamada D, Tomimaru Y, Tomokuni A, Asaoka T, Kawamoto K, Gotoh K, Marubashi S, Umeshita K, Nagano H, Doki Y, Mori M
  • 雑誌名: Surgery 巻: 160(5) ページ: 1227-1235
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Serum Metabolite Profiling for the Detection of Pancreatic Cancer: Results of a Large Independent Validation Study (2016)
  • 著者名/発表者名: Akita H, Ritchie SA, Takemasa I, Eguchi H, Pastural E, Jin W, Yamazaki Y, Goodenowe DB, Nagano H, Monden M, Mori M, Doki Y
  • 雑誌名: Pancreas 巻: 45(10) ページ: 1418-1423
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Calreticulin is highly expressed in pancreatic cancer stem-like cells (2016)
  • 著者名/発表者名: Matsukuma S, Yoshimura K, Ueno T, Oga A, Inoue M, Watanabe Y, Kuramasu A, Fuse M, Tsunedomi R, Nagaoka S, Eguchi H, Matsui H, Shindo Y, Maeda N, Tokuhisa Y, Kawano R, Furuya-Kondo T, Itoh H, Yoshino S, Hazama S, Oka M, Nagano H
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 107(11) ページ: 1599-1609
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Rubicon inhibits autophagy and accelerates hepatocyte apoptosis and lipid accumulation in nonalcoholic fatty liver disease (2016)
  • 著者名/発表者名: Tanaka S, Hikita H, Tatsumi T, Sakamori R, Nozaki Y, Sakane S, Shiode Y, Nakabori T, Saito Y, Hiramatsu N, Tabata K, Kawabata T, Hamasaki M, Eguchi H, Nagano H, Yoshimori T, Takehara T
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 64(6) ページ: 1994-2014
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Outcomes of Living Donor Liver Transplantation Alone for Patients on Maintenance Renal Replacement Therapy in Japan: Results of a Nationwide Survey (2016)
  • 著者名/発表者名: Eguchi S, Furukawa H, Uemoto S, Umeshita K, Imamura H, Soyama A, Shimamura T, Isaji S, Ogura Y, Egawa H, Kawachi S, Kasahara M, Nagano H, Ku Y, Ohdan H, Maehara Y, Sato S, Inomata Y
  • 雑誌名: Transplant Direct 巻: 2(6) ページ: e74
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Prediction of the efficacy of immunotherapy by measuring the integrity of cell-free DNA in plasma in colorectal cancer (2016)
  • 著者名/発表者名: Kitahara M, Hazama S, Tsunedomi R, Takenouchi H, Kanekiyo S, Inoue Y, Nakajima M, Tomochika S, Tokuhisa Y, Iida M, Sakamoto K, Suzuki N, Takeda S, Ueno T, Yamamoto S, Yoshino S, Nagano H
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 107(12) ページ: 1825-1829
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Increased FGF19 copy number is frequently detected in hepatocellular carcinoma with a complete response after sorafenib treatment (2016)
  • 著者名/発表者名: Kaibori M, Sakai K, Ishizaki M, Matsushima H, De Velasco MA, Matsui K, Iida H, Kitade H, Kwon AH, Nagano H, Wada H, Haji S, Tsukamoto T, Kanazawa A, Takeda Y, Takemura S, Kubo S, Nishio K
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 7(31) ページ: 49091-49098
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Simeprevir or telaprevir with peginterferon and ribavirin for recurrent hepatitis C after living donor liver transplantation: A Japanese multicenter experience (2016)
  • 著者名/発表者名: Ueda Y, Ikegami T, Soyama A, Akamatsu N, Shinoda M, Ishiyama K, Honda M, Marubashi S, Okajima H, Yoshizumi T, Eguchi S, Kokudo N, Kitagawa Y, Ohdan H, Inomata Y, Nagano H, Shirabe K, Uemoto S, Maehara Y
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 46(13) ページ: 1285-1293
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 肝細胞癌幹細胞様Sphere細胞における転移能亢進及びCD44 アイソフォーム発現 (2016)
  • 著者名/発表者名: 恒富亮一、永野浩昭、他
  • 学会等名: 第75回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2016-10-06 – 2016-10-08
• [学会発表] Calreticulinは膵癌幹細胞様細胞に高発現し膵癌患者の予後不良因子である (2016)
  • 著者名/発表者名: 松隈聰、永野浩昭、他
  • 学会等名: 第75回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2016-10-06 – 2016-10-08
• [学会発表] 肝転移能亢進を示す癌幹細胞様細胞におけるCD44 isoformsの発現 (2016)
  • 著者名/発表者名: 恒富亮一、永野浩昭、他
  • 学会等名: 第27回日本消化器癌発生学会総会
  • 発表場所: 鹿児島県鹿児島市（城山観光ホテル）
  • 年月日: 2016-09-15 – 2016-09-16
• [学会発表] 膵癌幹細胞様細胞に高発現する分子の同定と同分子の臨床的意義に関する検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 松隈聰、永野浩昭、他
  • 学会等名: 第27回日本消化器癌発生学会総会
  • 発表場所: 鹿児島県鹿児島市（城山観光ホテル）
  • 年月日: 2016-09-15 – 2016-09-16