| 研究課題/領域番号 |
15K10301
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
中村 元 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (80533794)
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| 研究分担者 |
尾崎 友彦 大阪大学, 医学部附属病院, その他 (00723123)
井間 博之 大阪大学, 医学部附属病院, その他 (00751695) [辞退]
貴島 晴彦 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (10332743)
浅井 克則 (浅井克則) 大阪大学, 医学部附属病院, その他 (20728977)
木谷 知樹 大阪大学, 医学部附属病院, その他 (60747426) [辞退]
村上 知義 大阪大学, 医学部附属病院, その他 (70747427)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | 脳梗塞 / 皮質拡延性抑制 / HMGB1 |
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| 研究実績の概要 |
本研究は、脳梗塞増大の一因と考えられている免疫応答反応と、虚血や外傷などの局所脳損傷時に損傷部周囲に自然発生する皮質拡延性抑制（cortical spreading depression：以下CSD）の相互作用を明らかにし、新たな脳梗塞治療法の開発を模索するものである。本研究グループは、免疫応答反応の契機となりうる物質として、虚血や外傷などの損傷脳の周辺領域に放出されるHigh mobility group box 1（以下HMGB1）と呼ばれる核内DNA結合タンパク質に注目し、HMGB1とCSDが互いに核外放出もしくは発生伝播を誘発しあうことが、脳損傷の二次性増悪の一因になると仮説した。
実際の研究は、まずマウスの脳表血流量をレーザースペックル血流計で定性的に可視化する実験系を作製するところから開始した。その後、塩化カリウムを脳表に塗布することで人為的にCSDを発生させ、CSD伝播がレーザースペックル血流計で観察できることを確認した。ちなみに、CSDは脱分極の波であり、厳密には膜電位変化の可視化が望ましいが、これは非常に難しい手法であるため、CSDに付随する組織血流変化の空間的モニタリングを行うことで代用した。
本年度の作業を行うことで、マウス脳表におけるCSDの発生頻度や伝播部位をカウントできるため、以後は特定部位におけるCSD伝播回数とHMGB1核外放出量の関連を検討することができる。
次年度以降は、HMGB1抗原投与によりCSD発生数が増加しうるか、HMGB1抗体投与によりCSD発生数や伝播範囲が抑制できるか、ついて検証する予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
本年度は、安定したマウス局所脳梗塞モデル作成および最適なレーザースペックル脳表血流計の設置条件検索に時間を要した。塩化カリウムによるCSD誘発は実施し得たものの、HMGB1塗布によるCSD発生への影響を確認するステップが次年度に繰り越された。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成28年度は、正常脳および虚血モデルを用いたCSD誘発およびHMGB1塗布実験を行い、その組織変化の程度を評価していく予定である。また、平成29年度は、抗HMBG1抗体投与によるCSD発生抑制の有無、そして、CSD抑制が結果的に梗塞巣の二次性増大を防ぐかどうかを検証する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
HMGB1抗原およびHMGB1抗体、その他免疫染色に必要な試薬の購入が3月末に間に合わなかったため、次年度使用額が発生してしまいました。
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| 次年度使用額の使用計画 |
次年度使用額を用いて、平成28年度に早急に上記物品を購入する予定です。
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