研究課題/領域番号 |
15K10332
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研究機関 | 神戸大学 |
研究代表者 |
西原 賢在 神戸大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (20452493)
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研究分担者 |
篠山 隆司 神戸大学, 医学部附属病院, 講師 (10379399)
田中 一寛 神戸大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (70467661)
水川 克 神戸大学, 医学部附属病院, 助教 (80403260)
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研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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キーワード | STAT3 / JAK / primary CNS lymphoma / IL-10 |
研究実績の概要 |
中枢神経原発悪性リンパ腫(PCNSL)は、大量MTX療法+放射線療法を行っても極めて予後不良であり、新たな治療法が必要である。また、PCNSL患者の髄液ではIL-10が上昇し、IL-10高値の患者は低値の患者に比べて予後不良である。IL-10は免疫抑制的に働き、JAK-STAT経路を活性化して、悪性リンパ腫の細胞の増殖や生存を促進すると考えられる。そこで本研究では、臨床サンプルを用いてPCNSLにおける髄液IL-10とJAK-STAT経路の活性化との関連性を解析し、さらにJAK-STAT経路を阻害することで、抗腫瘍効果が得られるかを解析することを計画している。 まず、40例のPCNSLの臨床サンプルを用いて、STAT3発現およびSTAT3のリン酸化状態を免疫染色で調べた。STAT3の発現はほぼすべてのPCNSL組織で強陽性を示した。リン酸化STAT3の発現については、発現強度および陽性細胞率でscore1~score6に分類した。結果は、score6が13例、score5が8例、score4が6例、score3が4例、score 2が9例で、平均score 4.3であった。髄液IL-10, IL-6の濃度との相関を検討したところ、髄液IL-10高値群ではリン酸化STAT3の発現が有意に高く、IL-6では有意な相関を認めなかった。また、western blotでもリン酸化STAT3の発現量と髄液IL-10濃度との統計学的な正の相関を認めた。このことから、髄液IL-10がPCNSLの細胞のSTAT3を活性化している可能性が示唆された。次に、PCNSL培養細胞を用いて、髄液IL-10を投与すると、STAT3のリン酸化蛋白の発現が上昇し、IL-10抗体で抑制すると、STAT3のリン酸化蛋白の減少を来したことから、髄液IL-10が実際にPCBNSL細胞のSTAT3を活性化していることが明らかとなった。また、ヌードマウスの皮下にPCNSL細胞を移植し、成長した皮下リンパ腫組織内にIL-10蛋白を注射すると、リンパ腫のSTAT3のリン酸化蛋白の上昇を認めたため、IL-10がin vivoでPCNSL細胞のSTAT3を活性化することが判明した。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
髄液IL-10の濃度と、中枢神経リンパ腫組織のJAK-STAT3活性の関係を、免疫染色及びウェスタンブロットで調べ、有意な相関を認めたこと、また、ヌードマウスの皮下にPCNSL細胞を移植してできた皮下PCNSL腫瘍組織でも、IL-10投与によりJAK-STAT3経路の活性化を認めたことで、順調に進展しているものと思われる。
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今後の研究の推進方策 |
今後は、PCNSL細胞株や患者由来のPCNSL細胞を用いて、IL-10投与によるJAK-STAT経路の活性化の程度や、増殖能、薬剤耐性能、アポトーシス抵抗性などについて、in vitroで解析する。また、PCNSL細胞にJAK阻害薬を投与し、増殖能の低下やアポトーシス誘導などの抗腫瘍効果を解析する。さらにヌードマウスの脳内にPCNSL細胞を移植したモデルを作製し、JAK阻害剤をマウスに投与して、JAK阻害剤のPCNSLに対する抗腫瘍効果をin vivoで検討する。
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次年度使用額が生じた理由 |
物品(消耗品)の購入が遅くなったためであり、次年度に購入する予定です。
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次年度使用額の使用計画 |
細胞培養液などの購入をする予定です。
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