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2015 年度 実施状況報告書

先天性側弯症発症におけるAGBL5遺伝子の作用機序解析

研究課題

研究課題/領域番号 15K10395
研究機関信州大学

研究代表者

中村 幸男  信州大学, 学術研究院医学系(医学部附属病院), 助教 (00549488)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2019-03-31
キーワード遺伝子 / 生体内発現
研究実績の概要

これまで、生体内におけるagbl5遺伝子の発現部位、組織は不明であった。
agbl5遺伝子はヒト、マウス、ゼブラフィッシュなど種を超えて保存されるため、生命現象に重要な役割を果たす遺伝子と考えられる。
今回、生後1-2日のゼブラフィッシュ稚魚からtotal RNAを抽出し、agbl5遺伝子特異的なin situ hybridizationプローブを3つ作製した。また生成した各プローブと、生後数時間、1日、2日の稚魚を用いて、whole-mount in situ hybridizationを行い、mRNAの発現解析を行った。
結果、脳、眼、胸ひれの一部にagbl5遺伝子の発現を認めた。以上より、agbl5遺伝子はこれら発現部位において何らかの機能を発揮していると予想された。特に、ゼブラフィッシュの胸ひれは内軟骨性骨化の過程を有し、ヒトの上肢に相当する器官である。
加えて、agbl5遺伝子特異的ノックダウンオリゴを新規に2つ作製し、現在ゼブラフィッシュ胚を用いて、ノックダウンを遂行中である。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

in situ hybridizationプローブ作製に、予想以上に時間がかかったため。

今後の研究の推進方策

agbl5遺伝子特異的ノックダウンオリゴ2つとゼブラフィッシュ胚を用いて、ノックダウンをさらに進める予定である。
さらにH28年度は、agbl5遺伝子全長のクローニングを行う予定である。

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公開日: 2017-01-06  

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