肉腫のエクソソームは本当に前転移ニッチを“教育”するのか？

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K10440
• 研究機関: 福井大学
• 研究代表者: 松峯 昭彦 福井大学, 学術研究院医学系部門, 教授 (00335118)
• 研究分担者: 柿本 拓也 三重大学, 医学系研究科, リサーチアソシエイト (50741162)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 骨肉腫 / エクソソーム / 肺転移 / 遺伝子

研究実績の概要

【目的】我々は、骨肉腫の肺転移に関わるExosomeの同定とその機能解析を行った。
【方法】実験は、マウス骨肉腫細胞株：Dunnと、その高肺転移株：LM8を用いた。①DunnとLM8に対し、PBS（control）、Dunn由来Exosome、LM8由来Exosomeを添加し細胞増殖（MTS assayで評価）、細胞移動能（Boyden Chamberを用いたMigration assayで評価）への影響を調べた。②DunnとLM8から放出されるexosomeの量をタンパクレベルで比較した。③DunnとLM8培養上清由来Exosomal miRNAの発現プロファイルをmicroRNA arrayで網羅的に解析し、qRT-PCRで再現性を確認した。④マウス背部にDunn、LM8を移植し、腫瘍形成後に採取したマウス血清を用いてmiRNAの発現プロファイルをmicroRNA arrayで解析した。⑤LM8で高発現していたmiRNAをDunnに導入し増殖・移動能に関する影響を調べた。
【結果】①LM8由来ExosomeはDunn細胞の増殖能と移動能を促進した。②LM8はDunnの約1.7倍量のexosomeを培養液中に放出していた。③Exosomal miRNAの発現解析では、LM8 はDunnと比較して、8種類のmiRNAが4倍以上の発現量を示していた。④LM8で高発現していた、miR-AとmiR-Bは、マウスの血清中exosomeでも約1.5倍高発現していた。⑤miRNAの機能解析において、miR-AはDunnの増殖を促進し、miR-BはDunnの移動能を促進した。
【考察および結論】LM8では、Dunnと比較して、より多量のexosomeを放出すると共に、特定のexosomal miRNAの発現量が増加していることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] Infiltrative tumor growth patterns on magnetic resonance imaging associated with systemic inflammation and oncological outcome in patients with high-grade soft-tissue sarcoma (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakamura T, Matsumine A, Matsubara T, Asanuma K, Yada Y, Hagi T, Sudo A
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 12(7) ページ: e0181787
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0181787
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficacy of Trabectedin in Patients with Advanced Translocation-Related Sarcomas: Pooled Analysis of Two Phase II Studies (2017)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M, Takahashi S, Araki N, Sugiura H, Ueda T, Yonemoto T, Morioka H, Hiraga H, Hiruma T, Kunisada T, Matsumine A, Shimura M, Kawai A
  • 雑誌名: Oncologist 巻: 22(8) ページ: 979-988
  • DOI: 10.1634/theoncologist.2016-0064
  • 査読あり
• [雑誌論文] The diagnostic and prognostic value of interleukin-6 in patients with soft tissue sarcomas (2017)
  • 著者名/発表者名: Hagi T, Nakamura T, Iino T, Matsubara T, Asanuma K, Matsumine A, Sudo A
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 7(1) ページ: 9640
  • DOI: 10.1038/s41598-017-08781-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of Factors for Predicting Survival in Soft-tissue Sarcoma with Metastatic Disease at Initial Presentation (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakamura T, Katagiri H, Shido Y, Hamada S, Yamada K, Nagano A, Yamada S, Tsukushi S, Ishimura D, Matsumine A, Sudo A, Nishida Y
  • 雑誌名: Anticancer Res 巻: 37(6) ページ: 3137-3141
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of tumor volume doubling time on post-metastatic survival in bone or soft-tissue sarcoma patients treated with metastasectomy and/or radiofrequency ablation of the lung (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakamura T, Matsumine A, Takao M, Nakatsuka A, Matsubara T, Asanuma K, Sudo A
  • 雑誌名: Onco Targets Ther 巻: 10 ページ: 559-564
  • DOI: 10.2147/OTT.S121562
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of pulmonary nodules in patients with high-grade soft tissue sarcomas. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakamura T, Matsumine A, Matsusaka M, Mizumoto K, Mori M, Yoshizaki T, Matsubara T, Asanuma K, Sudo A
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 12(2) ページ: e0172148
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0172148
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phase 2 study of eribulin in patients with previously treated advanced or metastatic soft tissue sarcoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kawai A, Araki N, Naito Y, Ozaki T, Sugiura H, Yazawa Y, Morioka H, Matsumine A, Saito K, Asami S, Isu K
  • 雑誌名: Jpn J Clin Oncol 巻: 47(2) ページ: 137-144
  • DOI: 10.1093/jjco/hyw175
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ewing Sarcoma of the Bone With EWS/FLI1 Translocation After Successful Treatment of Primary Osteosarcoma (2017)
  • 著者名/発表者名: Yodoya N, Iwamoto S, Matsumine A, Azuma E, Toyoda H, Miura Y, Nakatani K, Imai H, Hirayama M, Komada Y
  • 雑誌名: J Pediatr Hematol Oncol 巻: 39(1) ページ: 6-9
  • 査読あり