| 研究課題/領域番号 |
15K10513
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
酒井 陽子 徳島大学, 大学病院, 講師 (90711862)
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| 研究分担者 |
田中 克哉 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部, 教授 (30263841)
堤 保夫 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部, 准教授 (90523499)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | インクレチン / 心筋梗塞サイズ / 低酸素 / イソフルラン |
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| 研究実績の概要 |
マウスの摘出心をランゲンドルフ酵素法にて潅流、得られた遊離心室筋細胞をラミニンを用いてディッシュに接着させる。通常培養液（グルコース濃度5.5 mmol/L）を「グルコースなし」のものに置き換え、特殊チャンバーを用い、1 時間低酸素状況(95%N2, 5%CO2) に暴露することで心室筋細胞に虚血状態をつくりだす。その後1 時間通常の培養状態に戻すことで再潅流状態とした。細胞をトリパンブルー染色することで死亡細胞と正常細胞を区別し、生存率を割り出した。GLP-1を前投与したGLP-1群、吸入麻酔薬イソフルラン（1.0 minimum alveolar concentration [MAC]）にて30 分間APC 刺激を与えたAPC によるプレコンディショニング群の生存率がコントロール群に比較して高かった。
マウスを人工呼吸下に開胸、血行動態を測定しながら、GLP-1・APC刺激を行った。その後、心臓冠動脈を30 分間閉塞し、2 時間の再潅流を行う。再び冠動脈を閉塞、EvansBlue を注入し心臓を取り出す。心臓をスライスし、再染色後心筋梗塞サイズを測定すると両群の心筋梗塞サイズが、コントロール群に比較して減少していた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
交付申請書に記載した「研究実施計画」通りに進捗しているため。
つまり、GLP-1を前投与したGLP-1群、吸入麻酔薬イソフルラン（1.0 minimum alveolar concentration [MAC]）にて30 分間APC 刺激を与えたAPC によるプレコンディショニング群の生存率がコントロール群に比較して高かった。
また、心筋梗塞サイズを測定すると両群の心筋梗塞サイズが、コントロール群に比較して減少していた。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成27年度に引き続き、実験1．と同様の実験を高グルコース濃度培養液（25.5 mmol/L）に一日インキュベートした心室筋細胞において行い（通常グルコース濃度は5.5 mmol/L）、各群の細胞生存率を計算する。これにより、高血糖がプレコンディショニングに及ぼす影響、GLP-1 とAPC の相互作用に及ぼす影響が明らかになる。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
平成27年度3月納品となり支払いが完了していないため、次年度使用額が生じた。
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| 次年度使用額の使用計画 |
平成28年度4月に支払い完了予定である。
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