本邦のバート・ホッグ・デュベ症候群の分子遺伝学的解析および疾患病態関連解析研究

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 15K10600
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 矢尾 正祐 横浜市立大学, 医学研究科, 教授 (00260787)
• 研究分担者: 中井川 昇 横浜市立大学, 医学研究科, 准教授 (00237207) ; 古屋 充子 横浜市立大学, 医学部, 准教授 (10361445) ; 蓮見 壽史 横浜市立大学, 附属病院, 助教 (40749876)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: バート・ホッグ・デュベ 症候群 / 遺伝性腎腫瘍 / FLCN遺伝子 / BHD症候群

研究実績の概要

遺伝性に腎腫瘍を発症する疾患は稀ではあるがこれまでに10種類以上が認知されている。その中の一つであるバート・ホッグ・デュベ (BHD) 症候群は2001年に初めて腎癌発症との関連が報告された比較的新しい疾患概念であり、本邦患者での詳細はほとんど不明で、適正な診断法や治療法、フォロー法も確立されていない。本研究では、i)本邦のBHD症候群患者を集積し、疫学や臨床病態の特徴を明らかにするとともに、家系患者の最適な診断法、治療・フォロー法の確立を目指す、ii)本症に発症する病変のうち、特に腎癌に着目しその発症機構の詳細を明らかにし、新たな治療法の開発を目指すことを目標とする。これまでにスクリーニングを行ったBHD疑い家系の数は157家系に達し、このうちの137例で責任遺伝子であるFLCNの胚細胞性遺伝子変異検出法による遺伝子診断を行い、120例で遺伝子変異が確認されたため最終的な確定診断に至った。また確定診断された家系患者312名の腎、肺、皮膚を含む合併病変に関する臨床病理学的情報を集積した。その結果腎癌の合併は患者全体では19%であったが、40歳以上の群では35%に達していた。さらに気胸の罹患は74%と高率であったが、皮膚腫瘍病変がきっかけで診断に至った症例は全く見られず、本邦患者では欧米で報告されているよりも皮膚病変が軽症であるという傾向が明らかとなった。さらにBHD症候群確定診断患者の嫌色素性腎がん1検体から不死化細胞株を新たに作成したので、今後基礎的な実験解析に使用可能と考えている。またBHD家系で見つかったFLCN遺伝子のH255Y, K508Rという2つの胚細胞性ミスセンス変異が、病的な変異である可能性が高いことを遺伝子改変動物モデルの系を用いて証明した。上記の知見はそれぞれ論文にまとめ報告を行った。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

当初の見込みを上まわる数の家系患者が研究期間中に全国規模で順調に集積できており、これらの診療、遺伝子診断とともに腎病変を含む臨床病理学的情報も継続して集積できている。現在、患者症例数とその臨床病理学的データに関しては本邦ではこれまでで最大規模のものと考えられる。その結果欧米例と共通する部分とともに、明らかに異なる本邦のBHD症候群での特徴的な臨床病態（phenotype）、遺伝子型(genotype)も見出している。それらのデータをもとに腎腫瘍病変の発症に関する遺伝学的、分子生物学的解析も並行して進め、幾つかの新しい基礎的知見を得た。これらの成果は複数の英文論文にまとめ報告にまでこぎつけている。

今後の研究の推進方策

i) 引き続き本邦でのBHD症候群患者を集積しその遺伝子診断を進めるとともに臨床病理学的特徴を明らかにし、家系患者の最適な診断法、治療・フォロー法の確立を目指す。
ii) 基本的に本疾患は稀であるため、引き続き関連する学会や研究会等で本研究の成果を積極的に発表、報告を行い、全国の医療者や患者への啓蒙、周知を広めまた協力を仰いでいく。
ii) 古典的な遺伝子変異検出法では胚細胞性変異が検出できないような症例がこれまでの研究を通し複数例見つかっており、これらについては新しい解析法が必要と考えられる。次世代シークエンス等での解析などが可能か今後検討を進めていく予定である。
iii) 本研究を通して、BHD症候群の確定診断では疾患原因遺伝子であるFLCNの変異検出（DNA test）が重要な位置を占めることが明らかとなった。そこでFLCN遺伝子の診断法を「先進医療A」等での取得を今後目指す。

次年度使用額が生じた理由

当初の見込みより試薬、消耗品代等が安く、23,000円程度と若干ではあるが節約できた。

次年度使用額の使用計画

残金は次年度の試薬、消耗品代等に充てる予定である。

研究成果

• [雑誌論文] H255Y and K508R missense mutations in tumour suppressor folliculin (FLCN) promote kidney cell proliferation. (2017)
  • 著者名/発表者名: Hasumi H, Hasumi Y, Baba M, Nishi H, Furuya M, Vocke CD, Lang M, Irie N, Esumi C, Merino MJ, Kawahara T, Isono Y, Makiyama K, Warner AC, Haines DC, Wei MH, Zbar B, Hagenau H, Feigenbaum L, Kondo K, Nakaigawa N, Yao M, Metwalli AR, Marston Linehan W, Schmidt LS.
  • 雑誌名: Hum Mol Genet 巻: ２６ ページ: ３５４－３６６
  • DOI: 10.1093/hmg/ddw392
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Establishment and characterization of BHD-F59RSVT, an immortalized cell line derived from a renal cell carcinoma in a patient with Birt-Hogg-Dube syndrome. (2017)
  • 著者名/発表者名: Furuya M, Hasumi H, Baba M, Tanaka R, Iribe Y, Onishi T, Nagashima Y, Nakatani Y, Isono Y, Yao M.
  • 雑誌名: Lab Invest 巻: ９７ ページ: 343-351
  • DOI: 1038/labinvest.2016.137
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Genetic, epidemiologic and clinicopathologic studies of Japanese Asian patients with Birt-Hogg-Dube syndrome. (2016)
  • 著者名/発表者名: Furuya M, Yao M, Tanaka R, Nagashima Y, Kuroda N, Hasumi H, Baba M, Matsushima J, Nomura F, Nakatani Y.
  • 雑誌名: Clin Genet 巻: ９０ ページ: 403-412
  • DOI: 10.1111/cge.12807
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Fluorescent and chromogenic in situ hybridization of CEN17q as a potent useful diagnostic marker for Birt-Hogg-Dube syndrome-associated chromophobe renal cell carcinomas. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kato I, Iribe Y, Nagashima Y, Kuroda N, Tanaka R, Nakatani Y, Hasumi H, Yao M, Furuya M.
  • 雑誌名: Hum Pathol 巻: ５２ ページ: 74-82
  • DOI: 10.1016/j.humpath
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] 家族性腎癌に対する手術治療 (2016)
  • 著者名/発表者名: 逢坂 公人, 横溝 由美子, 蓮見 壽史, 林 成彦, 槙山 和秀, 近藤 慶一, 中井川 昇, 矢尾 正祐
  • 雑誌名: 臨床泌尿器科 巻: 70 ページ: 565-572
• [学会発表] Birt-Hogg-Dube（BHD）症候群に発症した腎腫瘍に対する腎温存手術の検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 新堀萌香, 蓮見壽史, 荒木あずみ, 横溝由美子, 逢坂公人, 林成彦, 槙山和秀, 近藤慶一
  • 学会等名: 第81回日本泌尿器科学会東部総会
  • 発表場所: リンクステーション青森（青森県）
  • 年月日: 2016-10-08 – 2016-10-08
• [学会発表] FISH/CISH法によるCEN17qの検索は、BHD症候群関連の嫌色素性腎細胞癌を孤発例と鑑別する際の助けとなる (2016)
  • 著者名/発表者名: 加藤 生真, 入部 康弘, 長嶋 洋治, 黒田 直人, 田中 玲子, 中谷 行雄, 蓮見 壽史, 矢尾 正祐, 古屋 充子
  • 学会等名: 第105回日本病理学会総会
  • 発表場所: 仙台国際センター（宮城県）
  • 年月日: 2016-05-13 – 2016-05-13
• [学会発表] アジアにおけるBHD症候群の後方視的コホート研究 (2016)
  • 著者名/発表者名: 古屋 充子, 矢尾 正祐, 野村 文夫, 長嶋 洋治, 中谷 行雄
  • 学会等名: 第40回日本遺伝カウンセリング学会学術集会
  • 発表場所: 京都国際会館（京都府）
  • 年月日: 2016-04-04 – 2016-04-04