| 研究課題/領域番号 |
15K10601
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| 研究機関 | 岐阜薬科大学 |
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研究代表者 |
井口 和弘 岐阜薬科大学, 薬学部, 講師 (10295545)
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| 研究分担者 |
松永 俊之 岐阜薬科大学, 薬学部, 准教授 (80306274)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | 22Rv1細胞 / LNCaP細胞 / フルタミド / ビカルタミド / エンザルタミド |
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| 研究実績の概要 |
前立腺癌の薬剤抵抗性につながる酸化ストレス防御因子を明らかにする目的で、本年度は薬剤耐性前立腺癌細胞株を樹立するとともに、各種酸化ストレス防御因子の発現量を測定した。
まず、アンドロゲン受容体陽性前立腺癌細胞株22Rv1を用いて、各種抗アンドロゲン剤（フルタミド、ビカルタミド、エンザルタミド）に対して耐性を示す細胞株（22Rv1/FL、22Rv1/BIC、22Rv1/ENZ）を樹立した。これらの抗アンドロゲン剤耐性細胞株と既に樹立済みのLNCaP/FL細胞（フルタミド耐性アンドロゲン受容体陽性前立腺癌LNCaP細胞）について、アンドロゲン受容体および酸化ストレス防御因子の遺伝子発現量をRT-PCR法により測定した。その結果、各抗アンドロゲン剤耐性株はそれぞれの親株に比べ、アンドロゲン受容体の発現量の上昇が認められた。さらに、耐性株において、アルデヒド解毒酵素（aldo-keto reductase (AKR)1Cサブファミリー酵素AKR1C1、AKR1C2、AKR1C3）、ヘムオキシゲナーゼ（HO1）、NAD(P)H キノン還元酵素（NQO1）の発現上昇が観察された。また、ウェスタンブロット法により、酸化ストレス防御因子の発現制御に関わる転写因子Nrf2が核に移行していることが確認され、Nrf2が恒常的に活性化していることが示唆された。すなわち、抗アンドロゲン剤耐性獲得によりNrf2の恒常的活性化が引き起こされ、各種酸化ストレス防御因子の発現上昇に至ったことが推察された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本年度は、これまでに樹立した耐性株に加え、アンドロゲン受容体陽性前立腺癌細胞株22Rv1を用い、フルタミド、ビカルタミド、エンザルタミドのそれぞれに対して耐性を示す細胞を樹立し、その性状の解析にまで至った。これらの細胞株の樹立と解析は、当初の実験計画以上の進展であった。また、各種酸化ストレス防御因子の発現量について、遺伝子レベルでの測定結果が得られた一方、一部の因子のタンパク質レベルでの評価は検討中である。
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| 今後の研究の推進方策 |
酸化ストレス防御因子の発現上昇機序の更なる解明のために、酸化ストレス抵抗性と小胞体ストレスとの関連性を調べる。すなわち、各種進行前立腺癌細胞株における酸化ストレス防御因子発現量の評価を継続し、加えて、これらの細胞株でのストレス抵抗性獲得機序の解析を行う。具体的には、小胞体ストレスマーカーの発現およびプロテアソーム活性を測定する。さらに、標的候補因子の発現抑制実験を行い、抗アンドロゲン剤耐性前立腺癌細胞の抑制に関する候補因子の選定を予定している。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
ウェスタンブロットによる解析に至っていない因子があり、当初予定していた消耗品の購入をしなかったため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
抗体、試薬等の購入費として使用する。
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