| 研究課題/領域番号 |
15K10638
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| 研究機関 | 千葉大学 |
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研究代表者 |
伊藤 千鶴 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (80347054)
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| 研究分担者 |
年森 清隆 千葉大学, 未来医療教育研究センター, 特任教授 (20094097)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | 精子 / 卵子活性化 / エクアトリン / MN13 / ODF2 / 男性不妊症 |
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| 研究実績の概要 |
【１】Eqtnと卵活性化機能の関係を解析するために、以下の実験を行ってデータを得た。
１．Eqtn-/-雄マウスの卵活性化能および胚発生能を解析するために、Eqtn+/+とEqtn-/-マウスの雄をそれぞれ野性型雌マウスと交配させてplug形成後5時間後と10時間後の前核形成率と24時間後の2細胞形成率を比較して、差異があることが判った。
２．Eqtn rescue雄マウスを作製し、Eqtn-/-雄マウスおよびEqtn+/+雄マウスとの比較受精実験を行った結果、rescueマウスの胚発生率はEqtn+/+雄マウスと同程度に回復していることが判った。
３．Eqtn-/-(アクロシンEGFP(Acr-EQFP)トランスジェニック(Tg)マウスを作製して、先体反応誘起実験を行った結果、Eqtn-/-精子とEqtn+/+-Acr-EGFP精子の先体反応に差異がないことが判った。
４．Eqtn-EGFP-ODF2-2a-EGFPダブルTgマウスとAcr-EGFP-ODF2-2a-EGFPダブルTgマウスを作製した。現在、繁殖維持中であり、十分数のマウスが得られた後に受精実験を開始する予定である。
【２】ODF2と他の外側粗大線維タンパク質の関係を解析するためにODF3とODF4の遺伝子欠損マウス作製準備を開始した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
平成27年度の研究実施計画に沿って実験を行い、結果を得ている。ODF2-4-mCherry TgマウスとSpatc1-mChery Tgマウスはまだ完成していないが、Eqtn-/-Acr-EGFP TgマウスとEqtn-EGFP-ODF2-2a-EGFPダブルTgマウスとAcr-EGFP-ODF2-2a-EGFPダブルTgマウスの作製に成功した。Eqtn-/-雄マウスの解析も進んでおり、現在論文作成中である。
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| 今後の研究の推進方策 |
EGFP-ODF2-2a-EGFPダブルTgマウスの解析を進める。また、Acr-EGFP-ODF2-2a-EGFPダブルTgマウスも繁殖中であり、十分数のマウスが得られた後に受精実験を開始する。
ODF2と他の外側粗大線維タンパク質の関係を解析するために、CRISPR/Cas9システムを用いてODF3とODF4の遺伝子欠損マウスを作製する。マウス作製に必要なインジェクションシステムは、当教室所有の機器を使用する。
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