| 研究課題/領域番号 |
15K10789
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| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
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研究代表者 |
鈴木 元彦 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50326138)
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| 研究分担者 |
飛田 秀樹 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00305525)
中村 善久 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90360023)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | siRNA / 制御性T細胞 |
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| 研究実績の概要 |
近年、新しい治療手段としてRNA干渉が注目されている。RNA干渉はsiRNA（small interfering RNA, short interfering RNA）という21-23bp塩基対の短い合成二本鎖RNAによって惹起されるが、この現象を利用することで特定の遺伝子の発現を抑制することが可能となる。私たちはsiRNAの性質上アレルギー疾患の治療に応用できるのではないかと考え、アレルギー疾患に対するsiRNAの有用性について研究してきた。その結果、CD40 siRNA発現ベクター（CD40 shRNA）の直接投与がアレルギー反応や症状を抑制することを証明した。さらに、その作用メカニズムを調べた所、In vivo（生体内）にて誘導された抗原特異的制御性T細胞を介して、CD40ノックダウン抗原特異的樹状細胞がアレルギー反応やアレルギー性鼻炎を制御していることを確認した。従って、siRNAと樹状細胞を用いたIn vitro（生体外）における抗原特異的制御性T細胞の誘導は、抗原特異的制御性T細胞を用いたより効果的で安全な治療法となりうる。
H27年度はCD40 siRNA導入抗原特異的樹状細胞とTNF-alfa siRNA導入抗原特異的樹状細胞の樹立に成功した。そして現在、CD40 siRNA導入抗原特異的樹状細胞とTNF-alfa siRNA導入抗原特異的樹状細胞によるナイーブT細胞への影響を調べている。特にナイーブT細胞から制御性T細胞への誘導に関する影響について調べている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
CD40 siRNA導入抗原特異的樹状細胞とTNF-alfa siRNA導入抗原特異的樹状細胞の樹立に成功したため。
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| 今後の研究の推進方策 |
制御性T細胞の誘導をFACS、Real time PCRにて調べる。FACSにおいてはCD25、Foxp3等に対する抗体を用いる。Real time PCRにおいてはCD25、Foxp3等に対するプライマーを用いて調べる。また、誘導された制御性T細胞の抗原特異性やアレルギー反応抑制能については、抗原特異的T細胞反応の抑制試験（Inhibition test）を用いて確認する。具体的には脾臓T 細胞増殖反応抑制を[3H]thymidineの取り込みの低下によって評価したり、産生されるサイトカイン（IL-4、IL-5、IL-13、IFN-gamma等）の変化によって評価したりする。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
予定していた研究の中で今年度中に施行できなかったものがあったため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
マウス、抗体、細胞培養液、ピペット器具、PCRプライマー、FBS、導入試薬などを購入する予定である。
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