研究課題/領域番号 |
15K10926
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研究機関 | 京都府立医科大学 |
研究代表者 |
古川 泰三 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (20515291)
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研究分担者 |
佐和 貞治 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10206013)
木村 修 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任教授 (10315963)
坂井 宏平 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (30515292)
田尻 達郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80304806)
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研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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キーワード | 小児呼吸器外科学 / 先天性横隔膜ヘルニア / ウサギ / Tracheal occlusion / ボンベシン |
研究実績の概要 |
我々はこれまでnitrofenを投与して作成したCDHラットモデルに対して神経ペプチドであるボンベシン(BBS)が肺成熟を促す作用があることを証明した。しかし、nitrofen投与モデルはCDHを認めなくても低形成肺をきたすと言われている。今回nitrofenによる肺低形成作用因子を除外するため、またCDH胎仔を出生させた後の呼吸状態を観察するために、ウサギ胎仔の横隔膜を人工的に切開したモデルを作成し、BBSの効果を検討する。H27年度に予定していた研究は、動物モデルとしてNew-Zealand White rabbitの妊娠ウサギ(term 31days)のpseudoglandular stageの時期に相当する妊娠23日にウサギ胎仔を子宮から取り出し、左開胸を施行し、左横隔膜の一部を切開し横隔膜ヘルニアモデル(DHモデル)を作成、これらのモデルをBBS投与群、非投与群に分け効果を判定することであった。DHモデル作成時にまず妊娠ウサギにケタミン35mg/kg、キサラジン6mg/kgを筋注、1.5%イソフルランを吸入させて全身麻酔をかけるが、ストレスに弱く、深麻酔になると呼吸抑制が強くなり、死亡することもあった。また、ウサギ胎仔の左横隔膜を切開し得たモデルも、妊娠ウサギ再開腹時に死亡しており、DHモデル作成が進んでいないのが現状である。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
本年度の研究はDHモデルを作成し、BBS投与群、非投与群に分けBBSの効果を検討する予定であったが、DHモデル作成に難渋している。DHモデル作成時にまず妊娠ウサギにケタミン35mg/kg、キサラジン6mg/kgを筋注、1.5%イソフルランを吸入させて全身麻酔をかけるが、ストレスに弱く、深麻酔になると呼吸抑制が強くなり、死亡することもあった。また、ウサギ胎仔の左横隔膜を切開し得たモデルも、妊娠ウサギ再開腹時に死亡しており、DHモデル作成が進んでいないのが現状である。進捗状況としては遅れており、安定したDHモデル作成ができるように作成手技を検討して行く必要がある。
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今後の研究の推進方策 |
DHモデル作成を安定させるために、麻酔薬投与量の調整を万全にする。また、ウサギを用いた実験に精通した研究者に問い合わせ、安定したDHモデル作成を目指す。本研究はモデル作成が安定すれば、その後の肺組織の検体から生ずるデータ解析は問題なく進めることができるため研究結果がすぐに判明することになる。そのためにも次年度ではモデル作成の安定化に焦点を当て、その後のTracheal occlusionモデル作成に繋げたいと考えている。
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次年度使用額が生じた理由 |
ウサギ胎仔を用いたCDHモデルの作成が遅れており、予定していた研究が進まなかったため、今年度の使用額が減り、次年度使用額が生じることとなった。
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次年度使用額の使用計画 |
次年度は、モデル作成が進むと考えており、その場合に免疫染色、RT PCRに必要な抗体、試薬の購入に使用する予定である。
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