| 研究課題/領域番号 |
15K10936
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
岡崎 睦 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (50311618)
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| 研究分担者 |
西村 栄美 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (70396331)
松村 寛行 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教 (70581700)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | Confettiシステム / クローン解析 / 老化皮膚 / 遺伝毒性ストレス / 表皮角化細胞 / 色素細胞 / タモキシフェン |
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| 研究実績の概要 |
本研究では、クローン可視化マウス（Confettiシステム）を用いて、表皮の角化細胞、および色素細胞特異的にクローン解析が可能となるシステムを構築し、ストレス刺激を与えたマウス皮膚において個々の角化細胞や色素細胞の動態の解析を行った。
研究成果 ①表皮基底細胞の運命追跡システムの構築 ケラチン14プロモーター制御化にタモキシフェン(TAM)依存性にCre酵素を発現するK14creERT2マウスとCre酵素依存性に４色(GFP/YFP/RFP/CFP)の色素発現するROSA26brainbow2.1マウスを用いて、表皮基底細胞を効率的に色素でラベルするEpi-confettiシステムの構築を行い、表皮基底細胞の運命解析ができる系を確立した。その結果、表皮幹細胞クローンの可視化に成功した。②K14creERT2;Rosa26brainbow2.1マウスに７週齢で、TAMを５日間、連続投与を行い、表皮基底細胞のマルチカラーラベリングを行い、その後の運命を観察した。ラベリング後、11週齢、4.5ヶ月齢でのマウス尾部組織像ラベル後、11woでは、表皮基底細胞にマルチカラーラベルが見られ、4.5moのホールマウント像では、ラベリング細胞が徐々にクローンを形成する様子が観察された。③上記Epi-confettiシステムに、色素斑や角化異常を誘導する種々のストレス、発癌剤などを加えて観察した。程度の差を認めたものの、個々の表皮基底細胞に由来する細胞のクローン化が促進される傾向が認められた。さらに表皮基底細胞のうち、毛包間上皮由来のクローンにおいては発癌に関与する所見が得られた。④発癌刺激を加えたマウスの経時的観察を行い、表皮基底細胞クローンと発癌刺激との関わりについて分析した。さらに、発癌部位と異常角化部位における遺伝子発現の解析を行い、クローン化に関与する候補因子を同定した
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