| 研究課題/領域番号 |
15K11076
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
光安 岳志 九州大学, 大学病院, 助教 (00380519)
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| 研究分担者 |
中村 誠司 九州大学, 歯学研究科(研究院), 教授 (60189040)
中村 典史 鹿児島大学, 歯学部, 教授 (60217875)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | SHH / SHHシグナル経路 / アポトーシス |
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| 研究実績の概要 |
AM-1（HPV16DNA導入により不死化）、AM-3（変異型のCDK4、cyclinD1, TERT(human telomerase reverse transcriptase)とドミナントネガティブ型のp53遺伝子を初代培養細胞に導入）。正常口腔粘膜上皮不死化細胞株MOE-1（変異型のCDK4、cyclinD1, TERT(human telomerase reverse transcriptase)とドミナントネガティブ型のp53遺伝子を初代培養細胞に導入）を実験に用いて検討を行った。各細胞株においてHHシグナル経路遺伝子およびタンパクの発現の検索を行い、SHH、SMO、PTCH、GLI1、GLI2、GLI3の発現を確認した。
HHシグナル経路阻害薬がAM-1における増殖に与える影響についての検索を行い、細胞増殖実験 WSTアッセイおよびBrdU取り込み実験を行い、各HHシグナル経路阻害薬により増殖抑制を確認した。また各HHシグナル経路阻害薬によるアポトーシス誘導能の検索では １）TUNEL法によるアポトーシス陽性細胞率の比較 ２）Annexin V陽性細胞率の比較を行い、アポトーシスに与える影響を観察において有意にアポトーシスを誘導することが確認された。またアポトーシス関連遺伝子であるBcl-2、BAXについての検索では、HHシグナル経路阻害薬によりBcl-2の発現抑制とBAXの発現上昇を認め、細胞死が誘導されることが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
エナメル上皮腫細胞株を用いたSHHシグナル経路遺伝子およびタンパクの発現を確認し、AM-1を用いた検索では各種HHシグナル経路阻害薬による効果の観察が予定通りに進んでいる。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後はエナメル上皮腫細胞株AM-3を用いた検索もすすめながら、学会での報告や誌上発表の準備を進めていく予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
比較的順調に研究が順調であったため、消耗品の支出が予定より少なくなっている。
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| 次年度使用額の使用計画 |
引き続き研究を遂行していく予定であるので、消耗品の支出を中心に次年度に使用予定である。
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