| 研究課題/領域番号 |
15K11093
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| 研究機関 | 松本歯科大学 |
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研究代表者 |
平賀 徹 松本歯科大学, 歯学部, 准教授 (70322170)
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| 研究分担者 |
細矢 明宏 松本歯科大学, 歯学部, 講師 (70350824)
二宮 禎 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 講師 (00360222)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | がん / 骨転移 / がん幹細胞 / EpCAM |
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| 研究実績の概要 |
研究計画初年度である平成27年度は、EpCAMが骨転移に対して促進的に働くという示唆を得るために、骨転移性がん細胞株のEpCAM発現を検討したほか、EpCAM低/高発現がん細胞の分離およびその性状解析を行った。
1. 骨転移性がん細胞株のEpCAM発現： 動物実験で骨転移能を有するがん細胞株（骨転移性がん細胞株）のEpCAM発現をフローサイトメトリーにて検討した結果、発現レベルは様々であったが、多くの細胞株で陽性であった。
2. EpCAM低/高発現がん細胞の分離： 1の解析でJyg-MC(A)と4T1という2種類のマウス乳がん細胞株中にEpCAMの発現レベルが明らかに異なる2つのポピュレ－ションが存在することを見出した。そして、これらの細胞株からEpCAM低/高発現それぞれの画分をFluorescence-Activated Cell Sorting（FACS）にて分離することに成功した。
3. EpCAM低/高発現がん細胞のin vitro性状解析： 2の実験で分離したEpCAM低/高発現細胞の性状についてin vitroにて比較したところ、細胞形態および遺伝子発現からEpCAM陽性細胞が上皮系、EpCAM陰性細胞が間葉系形質を有することが示された。しかし、単層培養系での細胞増殖能、wound healing assayでの細胞遊走能、matrigel invasion assayでの細胞浸潤能においては両者の間に差は認められなかった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
平成27年度は、交付申請書に記載した研究実施計画に沿って実験を行い、計画の目標はほぼ達成されたと評価している。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成28年度は、平成27年度に確立した方法により分離したEpCAM低/高発現がん細胞を用いて、がん細胞のEpCAM発現とがん幹細胞様形質との関連についての解析を中心に、両者の性状比較をさらに進めていく。また、EpCAM発現と骨転移との関連について、動物モデルを用いた検討を行っていく予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
実験に使用している機器 Fluorescence-Activated Cell Sortor（FACS）の使用料の請求が使用月の翌月となるため、3月中に使用した機器使用料の支払いのため次年度使用額が生じた。
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| 次年度使用額の使用計画 |
平成28年度の研究費は、繰越分も含め、上記機器使用料の支払いのほか、充実した動物実験を行うための十分数の動物の確保、細胞の分離、培養、調整、解析に必要な細胞培養関連用品・試薬、および分子細分子細胞生物学実験試薬の購入に使用する予定である。
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