| 研究実績の概要 |
hPDL細胞においてEr:YAGレーザー照射後にTGF-β受容体阻害剤を加えることによりALP活性が低下したことから,その作用がTGF-βによるものであることが示唆された。しかしながら,レーザー照射が直接TGF-βを活性化しないことからTGF-βの活性化に関与しているMMPのレーザー照射による活性を調べた。MMP-2,MMP-3,MMP-8はレーザー照射により直接活性化はされなかったが,照射後3日目に未照射群と比べて遺伝子発現の有意な増加が認められた。以上のことが前年度までに明らかとなり,本年度は,TGF-βの活性化に関わるプラスミン活性を調べた。レーザー照射による活性は認められず,TGF-βの活性化にはMMPの遺伝子発現が深く関わっていることが考えられ,MMPの活性化に関与するHSP90α遺伝子発現についてqPCRを行って解析した。HSP90α遺伝子発現は,レーザー照射後1日目に未照射群と比較して有意な増加が認められ,MMPの活性化にはHSP90α遺伝子発現の関与が示唆された。
ブタ歯髄組織に対するEr:YAGレーザー照射はALP活性を上昇させる効果を有し,ゲラチンザイモグラフィーでは53,45,40 kDaのMMP活性が,カゼインザイモグラフィーでは33 kDaのnon-MMP活性が認められた。ブタ歯髄組織由来の不死化細胞(PPU-7細胞)に対するレーザー照射では,細胞増殖能及びALP活性において照射後3日目に未照射群と比較して有意に高い値を示した。以上のことが前年度までに明らかとなり,本年度は,PPU-7細胞におけるアポトーシスの影響を免疫染色により解析した。レーザー照射後1日目において未照射群に比べて有意にアポトーシスの陽性率が高く,3日目で顕著であった。また,レーザー照射によりMMP-2遺伝子発現の増強が認められ,TGF-β活性への関与が考えられた。
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