| 研究実績の概要 |
【目的】これまで私たちはティッシュエンジニアリングの手法を用いた凍結培養粘膜の治癒機転に関する研究を行い、凍結保存後の上皮細胞による凍結培養粘膜が従来のものと比べ口腔粘膜の再生能力がやや劣ることを明らかにした。そのため細胞の大きさが20μm以下の増殖能の高い均一な細胞集団をナイロンメッシュ法により選別した後に凍結保存し凍結培養粘膜の作製を試みたが、従来のものと治癒機転に大きな差がないことが示唆された。そこで本研究ではさらに細胞の大きさだけではなくmagnetic cell sortingにより細胞マーカーを用いて、増殖能の高い均一な細胞集団である口腔粘膜上皮前駆／幹細胞の選別を行った後に凍結保存を行い、それから作成した凍結培養口腔粘膜の粘膜再生能および再生機構を、従来の手法と細胞で作製したものと比較し疎の有用性を明らかにすることである。
【材料と方法】口腔外科外来小手術時に同意の得られた患者の余剰口腔粘膜を採取、上皮細胞を培養し20μmの孔を有するナイロンメッシュ法を用いる方法、magnetic cell sortingを用いた方法で小型細胞集団を選別（Izumi K, JDR 2007）細胞増殖能につき検討を行い、培養粘膜の作製を行う。
【結果】計画当初に使用していた試薬の変更（トリプシン、培地に添加する抗菌薬の濃度変更）を行い、ナイロンメッシュ法を用いた細胞の培養、培養粘膜の作製は可能となったものの、やはりmagnetic cell sortingを行うには至らなかった。
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