| 研究実績の概要 |
本年度は申請書に記載した研究目的のうち① 培養顎下腺原基の分枝形態形成に対するSHHの影響（至適濃度の再検討） ② SHHによるEGF受容体タンパク質の発現誘導 ③ SHHによるEGF受容体のmRNAの発現誘導について検討を行った．
【研究成果】
① 胎生13日齢の顎下腺原基に200 ng/ml, 500 ng/ml, 1,000 ng/mlおよび2,500 ng/mlのSHHを作用させ，分枝形態形成へのSHHの影響を検討した．その結果，1,000 ng/mlおよび2,500 ng/mlのSHHを作用させた顎下腺で，分枝形態形成が有意に促進されることがわかった．この結果から，以降の実験で用いるSHHの濃度を1,000 ng/mlとすることにした．② 胎生13日齢の顎下腺に，SHH（1,000 ng/ml）を0, 6, 12, 24および48時間作用させ，タンパク質抽出用の試料とした．回収された試料を用い，EGFR（ErbB1）の特異抗体を用いてイムノブロット解析を行なった．その結果，SHHで刺激６時間後からErbB1タンパク質量の増加と，ErbB1のリン酸化の亢進が認められた．③ 胎生13日齢の顎下腺に，SHH（1,000 ng/ml）を0, 1/2, 3, 6, 12, 24および48時間作用させ，RNAを抽出用の試料とした．回収された試料を用い，リアルタイムPCRを実施した．その結果，SHHでの刺激後，３時間目からErbB1, ErbB2およびErbB3のmRNAが有意に増加することが明らかになった．
【意義・重要性】
顎下腺の分枝形態形成にSHHが関与していること，また，SHHによる分枝形成促進作用に，EGF受容体が関与していると考えられた．このことから，顎下腺の器官形成におけるSHHの重要性が示唆された．
|
