|
本研究では，破骨前駆細胞が骨微小環境内で遊走，定着し分化する過程での細胞運動能に関するTGF-βおよびRANKLの影響を検討した．【方法】細胞はマクロファージ系破骨前駆細胞RAW264.7細胞(以下RAW細胞)を，薬剤はTGF-β1，SB431542（TGF-β1型受容体キナーゼ活性阻害剤）およびRANKLを使用した．RAW細胞を各種薬剤によって処理し，破骨細胞様細胞への分化を確認した．また，各種薬剤を24時間および72時間作用させたRAW細胞の細胞運動能の変化をmigration assayで検討し，RhoA，Rac1，Cdc42タンパク発現の変化をウエスタンブロット法にて検討した．さらに，各種薬剤を24時間および72時間作用させたRAW細胞の細胞接着能の変化をadhesion assayで検討した．【結果】破骨細胞様細胞への分化傾向はTGF-β1+ RANKL処理が最も高く，SB431542処理により分化は抑制された．24時間作用後のmigration assayでは，TGF-β1処理で細胞運動能が亢進し，SB431542処理により抑制されたが，72時間作用後ではTGF-β1処理で細胞運動能が低下し，SB431542処理により亢進した．また，24時間作用後では，TGF-β1処理によりRhoA，Rac1タンパクの発現は上昇したが，72時間作用後ではTGF-β1処理群のRhoA，Rac1，Cdc42タンパクの発現は減少した．24時間作用後のadhesion assayでは，TGF-β1作用群は接着能が低下し，その傾向はRAKLを併用作用させても同様であった．72時間作用後では，TGF-β1作用群の接着能の低下は回復傾向を示した．
|
