| 研究実績の概要 |
本課題では、頭頸部扁平上皮癌のがん幹細胞(CSC)マーカーとして同定したCD271に着目し、扁平上皮癌幹細胞におけるCD271を標的とした治療法の開発に取り組む。具体的には、①CD271責任ドメインとエフェクター分子の同定、②特異的抗体の開発とin vitro腫瘍阻害活性の解析、③CD271依存性の抗腫瘍免疫抑制機構の解明と特異抗体による治療モデルの構築、④細胞内ドメイン阻害による腫瘍縮小効果について解析を行う。これらのアプローチによりCD271陽性がん幹細胞群に関する研究を展開し、がん幹細胞の新たな標的を探索した。細胞内領域を欠損させたCD271過剰発現株を作成し、超免疫不全マウス(NOG)に移植したところ、腫瘍形成能が低下した。腫瘍形成には、CD271の下流シグナルが重要であると考えられた。MAPK, JNK,p38などのシグナルに着目しCD271をノックダウンした。造腫瘍能に関するシグナル伝達経路を解析したところ、JNKおよびp38シグナルが減少していた。一方、特異抗体の作成についてマウスにリコンビナント蛋白の免疫を行い、ハイブリドーマ作成を進めている。人工リンパ節を用いた抗体作成は効率が悪く手技としては通常の免疫法を用いて抗体樹立を行っている。エフェクター分子の同定を目指し、CD271の細胞内ドメインのリコンビナント蛋白および細胞に発現したデュアルタグ付きCD271を用いてHPCM２細胞株から会合分子を精製し、候補分子を少なくとも２種同定した。
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