| 研究実績の概要 |
「研究の目的」，「研究実施計画」に沿って幾つかの興味ある知見が得られた．具体的には，「Ⅰ．哺乳類ホスファチジルコリン特異的ホスホリパーゼC（PC-PLC）の分子実体の解明」について以下の結果が得られた．
ジアシルグリセロールキナーゼ（DGK）δをpleckstrin-homology domain (PH), C1 domain (C1), 介在領域を含めたcatalytic domain (CD), 2つのcoiled-coil structureを含む領域 (CC), sterile α motif domain (SAM) の5つに分け，マウス脳破砕物を用いてPC-PLC活性沈降能の強さを解析した.PC-PLC活性はCCによる沈降物が最も高く, 対照と比較して有意な差があり, 約7倍の活性を示した. 一方, 他の変異体（PH, C1, CD, SAM）では沈降したPC-PLC活性が低く, 対照と有意な差は認められなかった.そして今後，DGKδ-CC との相互作用を利用してPC-PLCの分子実体の解明を目指す．
また，従来のPC-PLC活性測定法では，バックグラウンド活性が高く，弱いPC-PLC活性を定量性良く測定することが困難であった．そこで，液体クロマトグラフィー/質量分析を用いた，感度が高く定量性の良い測定法を確立した（Anal. Biochem. 2017）．すなわちち，本法は従来法に比べ，低いバックグラウンド活性 (0.02% 対 91%), 高いシグナル/ノイズ比 (7294 対 4.4), 高い感度（32倍以上），低い定量限界 (0.04 pmol 対 0.69 pmol of PC-PLC)を持っていた．
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