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本研究は葉緑体形質転換法を用い，感染特異的に葉緑体におけるROS消去系や循環的電子伝達系を増強し，ROS生成を低減して病徴発現を制御することを目的とする．平成29年度は，(1) これまでに作出したT7プロモーターの制御下に葉緑体アスコルビン酸過酸化酵素（APX）およびフェレドキシン（Fd）を発現する葉緑体形質転換体の採種，(2) 前年度に引き続き感染特異的PR1aプロモーター（ProPR1a）制御下で，葉緑体局在型T7 RNAポリメラーゼ(T7Rp)を効率良く発現するためのベクター構造の検討を行った．
(1) 4種類のFd遺伝子から輸送ペプチド（TP）領域を除去したものをT7プロモーターの制御下に発現する葉緑体形質転換体について，前年度作出し，遺伝子導入を確認した14系統中，9系統において採種中を行った．
(2) 前年度までにProPR1aを用いて葉緑体タンパク質を発現させることが困難であること，外来タンパク質を葉緑体に移行させるのに用いるTPとしてFdのTP（Fd-TP）が好適であり，さらにFd mRNAの5´非翻訳領域（5´-UTR）が翻訳産物の葉緑体への輸送効率を高めることを明らかにした．そこで，5´-UTRとTPの組合せが輸送効率に重要であるのか，それともFdの5´-UTRがTPの種類によらず輸送効率を高めうるのかを明らかにする目的で，ProPR1aの支配下にFdまたはPR1aの5´-UTRとFdのものを含む5種類のTPを持つEGFP発現するベクターの構築を試みた．また，Fdの5´-UTRがmRNAの細胞内局在に及ぼす影響をmRNAイメージング系の構築も試みた．前者については構築に時間がかかり，すべての組合せの構築を完了したが，輸送効率の比較検討を完了し，輸送効率の比較検討を継続中である．また，後者については構築を継続している．
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