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2016 年度 実施状況報告書

ウシ血中エクソソーム中のマイクロRNAを利用した超早期妊娠診断法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 15K14838
研究機関岩手大学

研究代表者

木崎 景一郎  岩手大学, 農学部, 教授 (40337994)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワードmiRNA
研究実績の概要

血漿(血清)由来のエクソソームに内包されるマイクロRNA(miRNA))に焦点をあて,ウシの妊娠診断・新規バイオマーカーの探索を目的とし,今年度は人工授精牛の血漿に存在する特異的miRNA分子種の検出を試みた。
人工授精後21日の牛からEDTA採血管を用いて採血し、血漿を得た。血漿中miRNAはmiRNeasy serum/plasmaキットを用いて抽出し、独自に開発したmiRBase 19.0 対応のウシ・カスタムmiRNAマイクロアレイ(Agilent G4474A-063969、755 miRNA対応配列搭載) による解析を行った。なお、人工授精後21日の妊娠牛(n=4)および非妊娠牛(n=3)での比較を実施した。755個のウシmiRNAを標的にしたマイクロアレイで検出可能であったmiRNAは128分子種であった。また、高発現を示す上位10分子種のmiRNAでは、妊娠牛と非妊娠牛での発現差は認められなかった。一方、妊娠および非妊娠牛群で発現の認められたmiRNAのうち2倍以上の変動を示したものは5つ存在した。その5分子種のmiRNAすべてが妊娠牛で上昇していた。さらに妊娠牛では発現していたが非妊娠牛で検出されなかったmiRNAは33分子種であった。これらのmiRNA分子種の個別定量および標的遺伝子の探索については解析中である。現在までに得られた成果から,妊娠血漿中に特異的に検出されるmiRNA分子種が明らかとなった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

妊娠血漿中に特異的に検出されるmiRNA分子種が同定されたことから,妊娠診断の新規バイオマーカー開発の可能性が示された。

今後の研究の推進方策

今後,各miRNAの個別定量による検証と、発情周期を含めた他試料との比較解析も実施し、新規バイオマーカーとしての有用性を明らかにする。さらに、標的遺伝子との相互作用を含む機能的な役割についても解析を加える予定である。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2016

すべて 学会発表 (4件)

  • [学会発表] ウシ栄養膜細胞系への効果的な遺伝子導入2016

    • 著者名/発表者名
      與座明祥,石黒(大沼)俊名,高橋透,橋爪一善,木崎景一郎
    • 学会等名
      第89回日本生化学会大会
    • 発表場所
      東北大学(宮城県仙台市)
    • 年月日
      2016-09-25 – 2016-09-27
  • [学会発表] ウシ栄養膜に発現するmiRNAの探索2016

    • 著者名/発表者名
      與座明祥,石黒(大沼)俊名,高橋透,細江実佐,橋爪一善,木崎景一郎
    • 学会等名
      第109回日本繁殖生物学会大会
    • 発表場所
      日本大学(神奈川県藤沢市)
    • 年月日
      2016-09-11 – 2016-09-15
  • [学会発表] 血管新生制御因子バソヒビンのウシ子宮・胎盤における発現動態2016

    • 著者名/発表者名
      佐藤良平,石黒(大沼) 俊名,高橋透,橋爪一善,木崎 景一郎
    • 学会等名
      第159回日本獣医学会学術集会
    • 発表場所
      麻布大学(神奈川県相模原市)
    • 年月日
      2016-09-06 – 2016-09-08
  • [学会発表] Effects of dietary forage and calf starter on ruminal pH and transcriptomic adaptation of rumen epithelium in Holstein calves during weaning transition2016

    • 著者名/発表者名
      Yohan Kim,渡部祐未,田路矩之,木崎景一郎,一條俊浩,佐藤 繁
    • 学会等名
      第159回日本獣医学会学術集会
    • 発表場所
      日本大学(神奈川県藤沢市)
    • 年月日
      2016-09-06 – 2016-09-08

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公開日: 2018-01-16  

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