研究課題/領域番号 |
15K14869
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研究機関 | 岐阜大学 |
研究代表者 |
前田 貞俊 岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (50377694)
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研究分担者 |
谷 健二 山口大学, 獣医学部, 准教授 (00365420)
西藤 公司 東京農工大学, (連合)農学研究科(研究院), 准教授 (20365422)
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研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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キーワード | 犬毛包虫症 / 自己免疫疾患 |
研究実績の概要 |
正常イヌの全血より末梢血単核球を分離した。単球を除去することによって300万個のリンパ球を得た。得られたリンパ球を抗犬CD3モノクローナル抗体固相化プレートにて初期培養した後、IL-2を含む無血清培地で2日間培養した。得られたリンパ球は直ちに細胞保存液を用いてマイナス80度で保存した。この作業を2週間繰り返すことによって、最終的には約3000万個のリンパ球を得た。得られたリンパ球におけるCD8陽性細胞比率を調べたところ約60-80%であった。培養リンパ球から磁気細胞除去によってCD4陽性細胞を除去し、最終的には約100万個のCD8陽性細胞を得た。得られたCD8陽性細胞100万個をSCIDマウスの腹腔内に移入した。移入29日後に、イヌCD8陽性細胞定着の有無をFACSおよびPCRで評価したが、いずれにおいても定着を示す結果は得られなかった。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
イヌCD8細胞移入マウスが確立していないため。
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今後の研究の推進方策 |
マウスに移入するイヌCD8細胞数を200万個に増やし、再度移入モデルの確立を目指す。
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