新規リパーゼ様膜蛋白質による皮膚バリア機能形成機序の解明と制御薬物の探索

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K15053
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 金井 好克 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (60204533)
• 研究分担者: 永森 收志 大阪大学, 医学系研究科, 准教授 (90467572) ; 大垣 隆一 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (20467525) ; 奥田 傑 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (50511846) ; 中込 咲綾 大阪大学, 微生物病研究所, 特任研究員(常勤) (60423894) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 表皮バリア / 角質細胞間脂質ラメラ / リパーゼ / リピドミクス

研究実績の概要

ラット腸骨リンパ節法により作成したモノクローナル抗体を用いて、免疫組織染色法によるLIPXの局在解析を試みた。同抗体はウエスタンブロット法において内在性LIPXが検出可能なレベルの良好な反応性を示したが、新生仔マウスの皮膚組織を用いた免疫組織染色では、野生型仔マウスとLIPXホモノックアウトマウスの間で染色像に違いが見られなかった。様々な組織固定法、抗原不活化法などの検討を継続して実施したが染色結果を改善することは出来ず、in vivoにおけるLIPXの詳細な局在を解明するには至らなかった。
前年度に引き続き新生仔マウスを用いた透過型電子顕微鏡観察をおこない、野生型とLIPXホモノックアウトマウスでは表皮組織構築に顕著な構造的異常が無いことを確認した。角質細胞間脂質ラメラ構造に関しては、LIPXホモノックアウトにおいてラメラの周期構造が不鮮明であることや、分断化したラメラが不規則に集積した構造など、形態異常が多くみられる事を明らかにした。LIPXの欠損による表皮バリア機能の破綻は、角質層細胞間脂質のラメラ構造に限局した異常が要因であることが示唆された。当初予定していたLIPXの基質および反応生成物の同定には至らなかったが、一方で、野生型とLIPXホモノックアウト仔マウスの角質層の脂質組成についてはさらなる詳細な解析を実施し、皮膚に特異的で表皮バリア機能に必須であるとされている、エステル化ω脂肪酸を含むセラミドクラスの総量の半減と、全体な脂肪酸の短鎖化を見出した。

研究成果

• [雑誌論文] 18F-FBPA as a tumor-specific probe of L-type amino acid transporter 1 (LAT1): a comparison study with 18F-FDG and 11C-Methionine PET. (2017)
  • 著者名/発表者名: Watabe T, Ikeda H, Nagamori S, Wiriyasermkul P, Tanaka Y, Naka S, Kanai Y, Hagiwara K, Aoki M, Shimosegawa E, Kanai Y, Hatazawa J.
  • 雑誌名: Eur J Nucl Med Mol Imaging. 巻: 44 ページ: 321-331
  • DOI: 10.1007/s00259-016-3487-1.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased Dynamics of Tricarboxylic Acid Cycle and Glutamate Synthesis in Obese Adipose Tissue: IN VIVO METABOLIC TURNOVER ANALYSIS. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nagao H, Nishizawa H, Bamba T, Nakayama Y, Isozumi N, Nagamori S, Kanai Y, Tanaka Y, Kita S, Fukuda S, Funahashi T, Maeda N, Fukusaki E, Shimomura I.
  • 雑誌名: J Biol Chem. 巻: 292 ページ: 4469-4483
  • DOI: 10.1074/jbc.M116.770172.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prognostic Significance of the Expression of CD98 (4F2hc) in Gastric Cancer. (2017)
  • 著者名/発表者名: Satoh T, Kaira K, Takahashi K, Takahashi N, Kanai Y, Asao T, Horiguchi J, Oyama T.
  • 雑誌名: Anticancer Res. 巻: 37 ページ: 631-636
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure-activity relationship of a novel series of inhibitors for cancer type transporter L-type amino acid transporter 1 (LAT1). (2017)
  • 著者名/発表者名: Kongpracha P, Nagamori S, Wiriyasermkul P, Tanaka Y, Kaneda K, Okuda S, Ohgaki R, Kanai Y.
  • 雑誌名: J Pharmacol Sci. 巻: 133 ページ: 96-102
  • DOI: 10.1016/j.jphs.2017.01.006.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Essential roles of L-type amino acid transporter 1 in syncytiotrophoblast development by presenting fusogenic 4F2hc. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ohgaki R, Ohmori T, Hara S, Nakagomi S, Kanai-Azuma M, Kaneda-Nakashima K, Okuda S, Nagamori S, Kanai Y.
  • 雑誌名: Mol Cell Biol. 巻: 37 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1128/MCB.00427-16.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ultrastructural immunohistochemical study of L-type amino acid transporter 1-4F2 heavy chain in tumor microvasculatures of N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) nitrosamine (BBN) induced rat bladder carcinoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kume E, Mutou T, Kansaku N, Takahashi H, Wempe MF, Ikegami M, Kanai Y, Endou H, Wakui S.
  • 雑誌名: Microscopy (Oxf). 巻: 24 ページ: 1-6
  • DOI: 10.1093/jmicro/dfx008.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Argininosuccinate Synthase 1-Deficiency Enhances the Cell Sensitivity to Arginine through Decreased DEPTOR Expression in Endometrial Cancer. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ohshima K, Nojima S, Tahara S, Kurashige M, Hori Y, Hagiwara K, Okuzaki D, Oki S, Wada N, Ikeda JI, Kanai Y, Morii E
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 7 ページ: -
  • DOI: 10.1038/srep45504.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Utilization of Liver Microsomes to Estimate Hepatic Intrinsic Clearance of Monoamine Oxidase Substrate Drugs in Humans. (2017)
  • 著者名/発表者名: Masuo Y, Nagamori S, Hasegawa A, Hayashi K, Isozumi N, Nakamichi N, Kanai Y, Kato Y.
  • 雑誌名: Pharm Res. 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1007/s11095-017-2140-4.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of amino acid transporter trafficking by mTORC1 in primary human trophoblast cells is mediated by the ubiquitin ligase Nedd4-2. (2016)
  • 著者名/発表者名: Rosario FJ, Dimasuay KG, Kanai Y, Powell TL, Jansson T.
  • 雑誌名: Clin Sci (Lond). 巻: 130 ページ: 499-512
  • DOI: 10.1042/CS20150554.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Up-Regulation of LAT1 during Antiandrogen Therapy Contributes to Progression in Prostate Cancer Cells. (2016)
  • 著者名/発表者名: Xu M, Sakamoto S, Matsushima J, Kimura T, Ueda T, Mizokami A, Kanai Y, Ichikawa T.
  • 雑誌名: J Urol. 巻: 195 ページ: 1588-1597
  • DOI: 10.1016/j.juro.2015.11.071.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure-activity relations of leucine derivatives reveal critical moieties for cellular uptake and activation of mTORC1-mediated signaling. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nagamori S, Wiriyasermkul P, Okuda S, Kojima N, Hari Y, Kiyonaka S, Mori Y, Tominaga H, Ohgaki R, Kanai Y.
  • 雑誌名: Amino Acids. 巻: 48 ページ: 1045-1058
  • DOI: 10.1007/s00726-015-2158-z.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interaction of the Sodium/Glucose Cotransporter (SGLT) 2 inhibitor Canagliflozin with SGLT1 and SGLT2: Inhibition kinetics, sidedness of action, and transporter-associated incorporation accounting for its pharmacodynamic and pharmacokinetic features. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohgaki R, Wei L, Yamada K, Hara T, Kuriyama C, Okuda S, Ueta K, Shiotani M, Nagamori S, Kanai Y.
  • 雑誌名: J Pharmacol Exp Ther. 巻: 358 ページ: 94-102
  • DOI: 10.1124/jpet.116.232025.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Core-fucosylation plays a pivotal role in hepatitis B pseudo virus infection: a possible implication for HBV glycotherapy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takamatsu S, Shimomura M, Kamada Y, Maeda H, Sobajima T, Hikita H, Iijima M, Okamoto Y, Misaki R, Fujiyama K, Nagamori S, Kanai Y, Takehara T, Ueda K, Kuroda S, Miyoshi E.
  • 雑誌名: Glycobiology. 巻: 26 ページ: 1180-1189
  • DOI: 10.1093/glycob/cww067.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficacy of system l amino acid transporter 1 inhibition as a therapeutic target in esophageal squamous cell carcinoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohshima Y, Kaira K, Yamaguchi A, Oriuchi N, Tominaga H, Nagamori S, Kanai Y, Yokobori T, Miyazaki T, Asao T, Tsushima Y, Kuwano H, Ishioka NS.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 107 ページ: 1499-1505
  • DOI: 10.1111/cas.13021.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of a human NPT1/SLC17A1 missense variant which increases urate export. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sakiyama M, Matsuo H, Nagamori S, Ling W, Kawamura Y, Nakayama A, Higashino T, Chiba T, Ichida K, Kanai Y, Shinomiya N.
  • 雑誌名: Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 巻: 35 ページ: 536-542
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impaired Amino Acid Transport at the Blood Brain Barrier Is a Cause of Autism Spectrum Disorder. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tarlungeanu DC, Deliu E, Dotter CP, Kara M, Janiesch PC, Scalise M, Galluccio M, Tesulov M, Morelli E, Sonmez FM, Bilguvar K, Ohgaki R, Kanai Y, Johansen A, Esharif S, Ben-Omran T, Topcu M, Schlessinger A, Indiveri C, Duncan KE, Caglayan AO, Gunel M, Gleeson JG, Novarino G.
  • 雑誌名: Cell. 巻: 167 ページ: 1481-1494
  • DOI: 10.1016/j.cell.2016.11.013.
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] 栄養食品成分の吸収・排出を担う膜輸送体の網羅的定量プロテオミクスによる変動解析Comprehensive proteomics reveals alteration of membrane transport proteins responsible for absorption and excretion of nutrients and food ingredients. (2017)
  • 著者名/発表者名: 永森收志
  • 学会等名: 2017年度 日本農芸化学会年会 シンポジウム「栄養食品成分の吸収と排出～膜を超える仕組み」
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2017-03-17 – 2017-03-20
  • 招待講演
• [学会発表] SGLT2阻害薬カナグリフロジンのヒトSGLT1およびSGLT2に対する作用キネティクスと阻害メカニズムの検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 大垣隆一、Ling Wei、山田和徳、原大樹、栗山千亜紀、奥田傑、植田喜一郎、Laurent Leclercq、Rao N.V.S. Mamidi、塩谷正治、永森收志、金井好克
  • 学会等名: 第90回 日本薬理学会年会
  • 発表場所: 長崎
  • 年月日: 2017-03-14 – 2017-03-16
• [学会発表] アミノ酸トランスポーターLAT1によるロイシン誘導体の認識とmTORC1シグナル活性化の関係 (2017)
  • 著者名/発表者名: 奥田傑、Pattama Wiriyasermkul、大垣隆一、永森收志、金井好克
  • 学会等名: 第90回 日本薬理学会年会
  • 発表場所: 長崎
  • 年月日: 2017-03-14 – 2017-03-16
• [学会発表] 有機アニオントランスポーターOAT1に対する芳香族アミノ酸誘導体の構造活性相関：イメージングプローブの腎臓におけるバックグラウンド集積を誘起する分子内構造の同定 (2017)
  • 著者名/発表者名: 魏玲、大垣隆一、富永英之、兼田加珠子、奥田傑、永森收志、金井好克
  • 学会等名: 第90回 日本薬理学会年会
  • 発表場所: 長崎
  • 年月日: 2017-03-14 – 2017-03-16
• [学会発表] 腫瘍細胞型アミノ酸トランスポーターリガンドの構造活性相関から見えてくる創薬標的としての意義 (2017)
  • 著者名/発表者名: 金井 好克
  • 学会等名: 第90回日本薬理学会年会シンポジウム「トランスポーターの分子同定から展開する創薬研究」
  • 発表場所: 長崎
  • 年月日: 2017-03-14 – 2017-03-16
  • 招待講演
• [学会発表] Amino acid transporter LAT1 as a novel molecular target for cancer diagnosis and therapeutics (2017)
  • 著者名/発表者名: Yoshikatsu Kanai
  • 学会等名: AMED-ALBERTA WORKSHOP FOR MEDICAL INNOVATION
  • 発表場所: Calgary, Alberta, Canada
  • 年月日: 2017-02-24 – 2017-02-25
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Pharmacology to innovative drug development: cancer therapeutics and diagnosis targeting amino acid transporters (2017)
  • 著者名/発表者名: Yoshikatsu Kanai
  • 学会等名: Campus Asia International Symposium (Ⅱ)
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2017-02-16 – 2017-02-16
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] がん細胞型アミノ酸トランスポーターを標的とした新規作用機序の抗悪性腫瘍薬と汎用性の高いがん特異的PETプロープの開発 (2017)
  • 著者名/発表者名: 金井 好克
  • 学会等名: 平成28年度創薬シーズ事業化コンペティション
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2017-02-13 – 2017-02-13
• [学会発表] 膜輸送複合体の機能的再構成人工膜－生体界面研究のモデル系を目指して (2017)
  • 著者名/発表者名: 永森收志
  • 学会等名: 第6回 生体界面研究会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2017-02-10 – 2017-02-10
• [学会発表] アミノ酸トランスポーターLAT1は胎盤合胞体性栄養膜の形成に必須である：膜融合関連因子4F2hcの細胞膜提示による細胞融合への寄与 (2016)
  • 著者名/発表者名: 大垣 隆一、大森 崇弘、原 早織、中込 咲綾、金井 正美、兼田 加珠子、奥田 傑、永森 收志、金井 好克
  • 学会等名: 第39回 日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2016-11-30 – 2016-12-02
• [学会発表] アミノ酸トランスポーターLAT1による基質認識とmTORC1シグナル活性化に必要なロイシンの構造部位の決定 (2016)
  • 著者名/発表者名: 奥田 傑, Pattama Wiriyasermkul, 大垣 隆一, 永森 收志, 金井 好克
  • 学会等名: 第130回 日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2016-11-16 – 2016-11-16
• [学会発表] アミノ酸トランスポーターLAT1阻害によるがん転移抑制効果の検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 兼田 加珠子, 魏 玲, Pornparn Kongpracha, 大垣 隆一, 永森 收志, 金井 好克
  • 学会等名: 第130回 日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2016-11-16 – 2016-11-16
• [学会発表] アミノ酸トランスポーターを標的とした創薬研究 (2016)
  • 著者名/発表者名: 永森收志
  • 学会等名: 第一回名古屋大学医薬系3部局交流シンポジウム
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2016-11-07 – 2016-11-07
  • 招待講演
• [学会発表] 腎近位尿細管に残されていた第二のシスチントランスポーターはシスチン尿症関連タンパク質rBATの未知なる結合相手だった (2016)
  • 著者名/発表者名: 永森收志
  • 学会等名: 第89回日本生化学会大会、シンポジウム「膜輸送体学の「温故知新」～長年の謎の解明をめざして」
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2016-09-25 – 2016-09-27
  • 招待講演
• [学会発表] がん細胞アミノ酸トランスポーターを標的としたがんの検出と細胞活性制御 (2016)
  • 著者名/発表者名: 金井 好克
  • 学会等名: 日本農芸化学会平成28 年度関西支部大会シンポジウム「アミノ酸研究の最前線」
  • 発表場所: 大津
  • 年月日: 2016-09-16 – 2016-09-16
  • 招待講演
• [学会発表] Amino acid transporters as targets for cancer-selective drug delivery and anti-cancer therapeutics (2016)
  • 著者名/発表者名: Yoshikatsu Kanai
  • 学会等名: 2nd Drug Transporters Forum
  • 発表場所: Lanzhou, China
  • 年月日: 2016-07-23 – 2016-07-23
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Novel cystine transporter in renal proximal tubule identified as a “missing partner” of cystinuria-related membrane protein rBAT/SLC3A1 (2016)
  • 著者名/発表者名: Nagamori S, Wiriyasermkul P, Espino Guarch M, Okuyama K, Nakagomi S, Okuda S, Ohgaki R, Palacin M, Kanai Y.
  • 学会等名: 第25回 日本尿路結石症学会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2016-07-20 – 2016-07-20
• [学会発表] Transporter and urolithiasis (2016)
  • 著者名/発表者名: Yoshikatsu Kanai
  • 学会等名: 13th International Symposium on Urolithiasis
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2016-07-19 – 2016-07-22
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Inhibition kinetics, sidedness of action, and transporter-mediated uptake of the sodium/glucose cotransporter (SGLT) 2 inhibitor canagliflozin: implications for its pharmacodynamic and pharmacokinetic features (2016)
  • 著者名/発表者名: Ling Wei, Ryuichi Ohgaki, Kazunori Yamada, Taiki Hara, Chiaki Kuriyama, Suguru Okuda, Kiichiro Ueta, Masaharu shiotani, Shushi Nagamori and Yoshikatsu Kanai
  • 学会等名: International and Interdisciplinary Symposium 2016 “Towards a New Era of Cardiovascular Research”
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2016-07-12 – 2016-07-13
  • 国際学会
• [学会発表] Significance of the comprehensive and quantitative proteomics of membrane transport proteins in drug discovery and in silico modeling. (2016)
  • 著者名/発表者名: Shushi Nagamori
  • 学会等名: International and Interdisciplinary Symposium 2016“Towards a New Era of Cardiovascular Research”
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2016-07-12 – 2016-07-13
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] トランスポーターを標的とした創薬 (2016)
  • 著者名/発表者名: 金井 好克
  • 学会等名: 千里ライフサイエンスセミナーK2「トランスポーターと創薬：構造と病態からのアプローチ」
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2016-07-06 – 2016-07-06
  • 招待講演
• [学会発表] PEG結合リン脂質型蛍光分子プローブの 細胞膜表層pHイメージングツールとしての有用性の検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 大垣 隆一、寺村 裕治、林 大智、永森 收志、高井 まどか、金井 好克
  • 学会等名: H28年度 生理研研究会（第5回 生体界面研究会）
  • 発表場所: 岡崎
  • 年月日: 2016-07-05 – 2016-07-05
• [学会発表] 栄養素トランスポーターを標的とした病態代謝制御：SGLT2阻害薬の最近の知見とアミノ酸・有機酸トランスポーターの創薬標的としての可能性 (2016)
  • 著者名/発表者名: 金井 好克
  • 学会等名: 第164回 分泌セミナー
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2016-07-02 – 2016-07-02
  • 招待講演
• [学会発表] Interaction of halogenated aromatic amino acid probes for tumor imaging with renal organic anion transporter OAT1: the mechanisms of renal accumulation of the imaging probes (2016)
  • 著者名/発表者名: Ling Wei、大垣 隆一、富永 英之、Quan Lili、兼田（中島）加珠子、奥田 傑、永森 收志、金井 好克
  • 学会等名: 第129回 日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2016-06-24 – 2016-06-24
• [学会発表] PEG結合リン脂質型蛍光分子プローブによる細胞膜表層pHのイメージング (2016)
  • 著者名/発表者名: 大垣 隆一、寺村 裕治、林 大智、永森 收志、高井 まどか、金井 好克
  • 学会等名: 第129回 日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2016-06-24 – 2016-06-24
• [学会発表] Inhibition kinetics, sidedness of action, and transporter-mediated uptake of the sodium/glucose cotransporter (SGLT) 2 inhibitor canagliflozin: implications for its pharmacodynamic and pharmacokinetic features (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohgaki R, Wei L, Yamada K, Hara T, Kuriyama C, Okuda S, Ueta K, Leclercq L, Mamidi RN, Shiotani M, Nagamori S, Kanai Y
  • 学会等名: 76th American Diabetes Association Scientific Sessionｓ
  • 発表場所: New Orleans, Louisiana, US
  • 年月日: 2016-06-10 – 2016-06-14
  • 国際学会
• [学会発表] Novel Cystine Transporter in Renal Proximal Tubule Identied as a “Missing Partner” of Cystinuria-Related Membrane Protein rBAT/SLC3A1. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nagamori S, Wiriyasermkul P, Okuyama K, Nakagomi S, Okuda S, Ohgaki R, Kanai Y.
  • 学会等名: The Kaback Symposium
  • 発表場所: Bethesda, Maryland, US
  • 年月日: 2016-06-09 – 2016-06-10
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Interaction of potential hepatotoxic ingredients of Traditional Chinese Medicine with liver drug transporters OATP1B1 and MDR1 (2016)
  • 著者名/発表者名: Lili Quan，Zijie Song, Yueqing Zhou, Ryuichi Ohgaki, Shushi Nagamori, Xin He, Yoshikatsu Kanai
  • 学会等名: 第63回 日本生化学会 近畿支部例会学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2016-05-21 – 2016-05-21
• [学会発表] Novel Cystine Transporter in Renal Proximal Tubule Identied as a “Missing Partner” of Cystinuria-Related Membrane Protein rBAT/SLC3A1. (2016)
  • 著者名/発表者名: 3.Nagamori S, Wiriyasermkul P, Okuyama K, Nakagomi S, Okuda S, Ohgaki R, Kanai Y.
  • 学会等名: Experimental Biology 2016
  • 発表場所: San Diego, CA, US
  • 年月日: 2016-04-02 – 2016-04-06
  • 国際学会