研究課題
ミトコンドリアの呼吸活性はあらゆる細胞、組織において重要な役割を担っており、その機能障害はミトコンドリア病を含む、循環器障害、生活習慣病、脳機能障害、がん、老化など様々な病態に関連していると考えられている。申請者らは、ミトコンドリア呼吸鎖超複合体の形成を促進するCOX7RPを初めて報告したが、このようなミトコンドリア呼吸鎖超複合体の制御に関わる因子はほとんど解明されていない。本研究は、COX7RPの結合因子の探索、呼吸鎖サブユニットの細胞内動態の解明、siRNAを用いたミトコンドリア呼吸鎖超複合体の制御因子等の解析を行い、呼吸鎖超複合体の制御機構を解明し、培養細胞系とCOX7RPノックアウトマウスを用いた生体モデルを活用して検証し、超複合体と細胞機能ならびに各種疾患との関連を解き明かすことを目的とする。本年度は複数のがん細胞株からミトコンドリア分画を調整した。また、これらの細胞に対して、低グルコース、低酸素などの処理を行って同様にミトコンドリア分画を調整した。これらのミトコンドリアを可溶化剤で処理した後、Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis (BN-PAGE)による2次元電気泳動を行い、ミトコンドリア呼吸鎖超複合体の形成などを解析した。また、COX7RPを過剰発現する細胞株を作製し、トランスクリプトーム解析を行い、呼吸鎖超複合体の制御に関わるシグナル経路の探索を行った。COX7RP遺伝子改変マウスの骨格筋、脳、肝臓などの各組織よりミトコンドリア分画を調整し、同様にBN-PAGEを用いて解析し、ミトコンドリア呼吸鎖超複合体の形成を解析した。
すべて 2017 2016
すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件、 謝辞記載あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (3件) (うち国際学会 1件)
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