消化器癌腹膜転移機構解明に向けての腹腔内遊離癌細胞解析技術の開発

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K15193
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 香川 俊輔 岡山大学, 大学病院, 准教授 (00362971)
• 研究分担者: 吉田 龍一 岡山大学, 大学病院, 助教 (80534768)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 消化器癌 / 腹膜播種 / 抗癌剤抵抗性 / 腫瘍微小環境

研究実績の概要

膵癌と胃癌での腹腔洗浄液の臨床検体においてTelomeScanによる腹腔内の癌細胞の可視化の検出と併存細胞の解析を行った。膵癌症例で通常の細胞診、TelomeScanによる癌細胞検出と、予後への影響を検討した。細胞診陽性症例中にTelomeScan陽性と陰性があり、一方細胞診陰性症例中にもTelomeScan陽性が認められた。症例は少なく追跡期間が短いが、細胞診では陽性-陰性間で予後に差がない一方で、TelomeScan陽性例は陰性例より予後不良であり、追跡期間を延長し観察を継続中である。
膵癌腹腔洗浄液中でのTelomeScan と各種抗体による多重免疫染色による細胞構成解析では膵癌細胞と併存する細胞としてM２タイプのマクロファージが確認された。単球系細胞株をM2分化誘導したマクロファージと膵癌細胞株との共培養実験では抗癌剤への抵抗性が惹起された。膵癌細胞株によるマウス腹膜播種モデルを確立させ、さらに膵癌細胞の腹膜播種へのマクロファージの影響を観察した。マクロファージの同時移植は膵癌細胞の腹膜播種の増大を促進した。さらにマクロファージ同時移植の膵癌腹膜播種マウスではGemcitabineの抗腫瘍効果が減弱し、マクロファージの化学療法抵抗性への関与が示唆された。
胃癌の腹腔洗浄液での研究では腹腔洗浄液でのTelomeScanによる癌細胞検出が有意に予後不良となることが確認された。また胃癌の腹腔内でもマクロファージはM2タイプへの分化傾向が確認された。腹腔内癌細胞の遺伝子解析のため腹腔洗浄液での胃癌細胞の捕捉からDNA抽出を試みたが収量が少なく解析が不可能であった。そこで癌細胞が検出できた検体を培養に移し癌細胞を増殖させた上で、DNA抽出を行ったところ、解析可能な胃癌細胞から十分量のDNAの回収が可能となることが確認され、遺伝子解析が可能となる実験系を確立できた。

研究成果

• [雑誌論文] Outcome of Radiation Monotherapy for High-risk Patients with Stage I Esophageal Cancer. (2017)
  • 著者名/発表者名: Shirakawa Y, Noma K, Maeda N, Tanabe S, Kuroda S, Kagawa S, Katsui K, Katayama N, Kanazawa S, Fujiwara T.
  • 雑誌名: Acta medica Okayama 巻: 71 ページ: 127-133
  • DOI: 10.18926/AMO/54981.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Nonexposure laparoscopic and endoscopic cooperative surgery (closed laparoscopic and endoscopic cooperative surgery) for gastric submucosal tumor. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi S, Nishizaki M, Kuroda S, Tanabe S, Noma K, Kagawa S, Shirakawa Y, Kato H, Okada H, Fujiwara T
  • 雑誌名: Gastric cancer 巻: 20 ページ: 553-557
  • DOI: 10.1007/s10120-016-0641-1
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tumor-specific delivery of biologics by a novel T-cell line HOZOT. (2016)
  • 著者名/発表者名: Onishi T, Tazawa H, Hashimoto Y, Takeuchi M, Otani T, Nakamura S, Sakurai F, Mizuguchi H, Kishimoto H, Umeda Y, Shirakawa Y, Urata Y, Kagawa S, Fujiwara T
  • 雑誌名: Scientific reports 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1038/srep38060.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Training system for laparoscopy-assisted distal gastrectomy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kuroda S, Kikuchi S, Hori N, Sakamoto S, Kagawa T, Watanabe M, Kubota T, Kuwada K, Ishida M, Kishimoto H, Uno F, Nishizaki M, Kagawa S, Fujiwara T
  • 雑誌名: Surgery today 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1007/s00595-016-1439-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Double-Flap Technique as an Antireflux Procedure in Esophagogastrostomy after Proximal Gastrectomy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kuroda S, Nishizaki M, Kikuchi S, Noma K, Tanabe S, Kagawa S, Shirakawa Y, Fujiwara T
  • 雑誌名: Journal of the American College of Surgeons 巻: 223 ページ: e7-e13
  • DOI: 10.1016/j.jamcollsurg.2016.04.041.
  • 査読あり
• [学会発表] Tumor associated macrophages promote malignant phenotypes of disseminated human gastric cancer cells in intraperitoneal cancer immune microenvironment (2017)
  • 著者名/発表者名: Shuichi Sakamoto, Shunsuke Kagawa, Kazuya Kuwada, Atene Ito, Tetsuya Kagawa, Satoru Kikuchi, Shinji Kuroda, Ryuichi Yoshida, Hiroshi Tazawa, Toshiyoshi Fujiwara
  • 学会等名: American Association for Cancer Research, Annual Meeting 2017
  • 発表場所: ワシントンDC, 米国
  • 年月日: 2017-04-01 – 2017-04-05
  • 国際学会
• [学会発表] 蛍光ウイルスによる腹腔内の腫瘍関連マクロファージと膵癌細胞の関連性の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 桑田 和也, 香川 俊輔, 坂本 修一, 渡邉 めぐみ, 香川 哲也, 菊地 覚次, 黒田 新士, 吉田 龍一, 浦田 泰生, 田澤 大, 藤原 俊義
  • 学会等名: 第75回 日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-10-06 – 2016-10-08
• [学会発表] Virus-guided fluorescent imaging of pancreatic cancer cells in the peritoneal cavity for an insight into roles of tumor-associated macrophage (2016)
  • 著者名/発表者名: Kazuya Kuwada, Shunsuke Kagawa, Megumi Watanabe, Shuichi Sakamoto, Tetsuya Kagawa, Satoru Kikuchi, Shinji Kuroda, Ryuichi Yoshida, Hiroshi Tazawa and Toshiyoshi Fujiwara.
  • 学会等名: The 22nd Annual Meeting of Japan Society of Gene and Cell Therapy
  • 発表場所: 虎ノ門ヒルズフォーラム（東京都港区）
  • 年月日: 2016-07-28 – 2016-07-30
  • 国際学会
• [学会発表] Intraperitoneal macrophages in patients with gastric cancer are polarized to promote malignant phenotypes of disseminated cancer cells. (2016)
  • 著者名/発表者名: 渡辺 めぐみ, 香川 俊輔, 桒田 和也, 坂本 修一, 菊地 覚次, 黒田 新士, 岸本 浩行, 西崎 正彦, 田澤 大, 藤原 俊義
  • 学会等名: 第71回 日本消化器外科学会
  • 発表場所: あわぎんホール（徳島県徳島市）
  • 年月日: 2016-07-14 – 2016-07-16
• [学会発表] Clinical implications of fluorescence-emitting virus guided peritoneal cytology in gastrointestinal cancer. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kagawa S, Watanabe M, Kuwata K, Sakamoto S, Shigeyasu K, Tazawa H, Kuroda S, Kikuchi S, Yoshida R, Nishizaki M, Kishimoto H, Nagasaka T, Fujiwara T.
  • 学会等名: The 19th International Congress of Cytology: ICC2016
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-05-28 – 2016-06-01
  • 国際学会 / 招待講演