研究課題
1.平成27年度に樹立した変異陰性及び変異陽性CINCA-iPS細胞にそれぞれ、GFP及びmCherry遺伝子を発現するベクターをAAVS1遺伝子座に導入した細胞を用いて、それぞれを軟骨細胞に分化誘導した。誘導後も蛍光遺伝子の発現が維持されることを確認できた。2.標識した変異陰性及び変異陽性CINCA-iPS細胞を、これまでに確立した神経堤を経る培養法により軟骨前駆細胞へ分化誘導し、その後に両者をいくつかの比率で混合した細胞集団を作製し、3Dの軟骨分化誘導実験を行った。その結果、変異細胞を少数混合した場合でも、変異細胞のみのものと細胞塊のサイズは同等となることが判明し、細胞間相互作用が存在している可能性を示唆する結果が得られた。2.標識した変異陽性および陰性iPS細胞を、軟骨前駆細胞へ分化誘導した後、連携研究者が開発した培地共有培養装置を用いてフィルターで隔別されたwellに細胞を播種した後に、2Dの軟骨分化誘導実験を行った。その結果、正常細胞の遺伝子発現等の軟骨分化が亢進している結果が得られ、変異細胞からの液性因子の影響を示唆する結果が得られた。3.平成27年度の研究から、モザイク患者における正常細胞由来iPS細胞と変異細胞由来iPS細胞の機能を比較検討する際における、それぞれの細胞のクローン間の相違が顕著であるために、変異の有無による影響を正確に評価することが困難であることが判明した。そこでゲノム編集技術を用いて患者由来正常iPS細胞に変異を導入した細胞を用いる方針に変更し、その細胞の作製を行った。また同時に標準的iPS細胞に、CINCA症候群で観察される複数の変異を、それぞれ導入した細胞を作製した。
すべて 2016
すべて 雑誌論文 (1件) (うち国際共著 1件、 査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (4件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件)
Proc. Natl. Acad. Sci. U S A
巻: 113 ページ: 13057-13062