研究実績の概要 |
齲蝕原因菌の1つであるStreptococcus mutans(以下SM)は、バイオフィルムを形成し、その中で様々な環境ストレスに適応することにより齲蝕発症に関わっている。環境適応に際し、遺伝子発現レベルにおいて広範囲な制御が行われ、定常状態を呈していると考えられるが、その方法としてglobal gene regulationを介した遺伝制御に加え、degradosomeと呼ばれるmultiprotein complexの形成やsmall RNAsなどによる制御が行われている可能性があり,その関連性を解明することを目的とした。E.coliではdegradosome構成タンパクの1つであるenolaseのconstructの作成、ならびにscaffoldとなるRNaseに関してはターゲットとなる遺伝子として論文より選択したRNasesJ1,J2のcloning、constructを作成した。それぞれよりpull down assayを行い、multiprotein complexの形成について検討を行ったが結論を得るには追加検討が必要であった。 一方、global gene regulatorの探索に際し、SMの菌体外多糖の形成ならびに細菌増殖を抑制することで齲蝕抑制が期待されるtriterpenoid compoundsによる環境ストレス下での遺伝子発現の増減について検討を行った。Global response regulatorのcovRを含め、菌体外多糖形成やquorum sensing関連遺伝子の発現に変化を認めた。また、小児とその家族の口腔内より分離された臨床株を用いて、酸性状態での遺伝子変化について検討を行った。非伝播株は伝播株とに比べ、菌体外多糖形成や耐酸性関連遺伝子の発現量の低減傾向が認められ、これらの遺伝子発現による環境適応力と伝播との関連性が示唆された。
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