| 研究課題/領域番号 |
15K16239
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| 研究機関 | 金沢医科大学 |
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研究代表者 |
逆井 亜紀子 (坂井亜紀子) 金沢医科大学, 総合医学研究所, 特定助教 (60570059)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | 生活習慣病 / 非アルコール性脂肪肝炎 / AGEs / Toxic-AGEs (TAGE) |
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| 研究実績の概要 |
メタボリックシンドロームに伴う高血糖や、食事由来の終末糖化産物（AGEs）過剰摂取などにより、非アルコール性脂肪肝炎(NASH)を含む生活習慣病が増加している。生命に関わる深刻な病気への進行を防ぐためにも生活習慣病の早期発見と改善が不可欠であるが、発症を診断できるバイオマーカーは確立されていない。そこで本研究では生活習慣病との関連を見いだしつつあるToxic AGEsタンパク質 (TAGE) 群の中から、特にNASHの早期診断に有効な新規疾患マーカータンパク質を同定し、有用性を確認している。
平成28年度は、すでに研究代表者が絞り込みを行ったTAGE疾患マーカーの候補タンパク質について、そのタンパク質自体がTAGE化されているのかについて解析を行った。その結果、TAGEストレス条件下において疾患マーカータンパク質はTAGE化修飾を受けており、同定したTAGE疾患マーカーが、細胞内のTAGE毒性を直接評価できる事を明らかにした。
また、TAGE疾患マーカーとして同定したタンパク質は、TAGEストレスを受けていない生理的条件下であればアポトーシス細胞死へ関与することが報告されている。そこで、マーカータンパク質のTAGE化は、アポトーシス機能へどのように影響するのかについて解析した結果、GA処理を行った細胞ではアポトーシス実行機能を失っており、周辺細胞へ悪影響をより及ぼすネクローシス細胞死が引き起こされていた。この解析により、同定したTAGE疾患マーカータンパク質は、TAGE毒性の指標としてだけではなく、TAGE毒性を抑制するためのターゲット因子としても利用できる可能性があることを明らかにした。
また、TAGE疾患マーカーのTAGE化による活性化機能の喪失を指標として、TAGE毒性を抑制する因子のスクリーニングに着手しており、すでに複数の化合物に関して解析を進めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
TAGE前駆体をHepG2細胞に処理した結果生じる細胞傷害について詳細な解析を行った。前年度に絞り込みを終了したTAGEによる細胞毒性を評価できるマーカー（TAGE疾患マーカー）について、GA処理によりマーカーそのものがTAGE化を受けている事を明らかにするために、当初計画した免疫沈降法では解析が難しいことがわかった。そこで、精製されたタンパク質を購入し、TAGE前駆体と反応させる実験に変更した結果、疾患マーカーそのものがTAGE化されていることを明らかにした。また、そのTAGEストレスが細胞死に与える影響をフローサイトメトリーによる解析で明らかにしている。さらにTAGE疾患マーカーに対し、解毒作用をもつ因子の探索のスクリーニングも開始しており、現在、複数の化合物にTAGE形成およびTAGE化によるタンパク質機能障害を抑制する効果があることを明らかにしている。
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| 今後の研究の推進方策 |
当初の予定通り、平成28年度の結果をふまえ、同定したTAGE疾患マーカーが培養細胞だけではなく、疾患モデル動物でも有用性があるのかについて解明を続ける。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究が順調に進んだため、ほぼ予定通りの金額で研究費を使用した。
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| 次年度使用額の使用計画 |
当初の予定通り、平成29年度にはNASH発症モデルマウスを用いた解析を行う。
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