| 研究課題/領域番号 |
15K16537
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| 研究機関 | 国立研究開発法人国立国際医療研究センター |
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研究代表者 |
舟橋 伸昭 国立研究開発法人国立国際医療研究センター, その他部局等, その他 (30727491)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 生活習慣病 / DOHaD / エピジェネティクス / 低栄養 / 糖尿病 |
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| 研究実績の概要 |
様々な疾患の素因は，胎生期並びに乳幼児期の環境と遺伝子の相互作用により形成されるというDOHaD 説が近年注目されている．我が国では出生体重2500g以下の低出生体重児の出生率が増加しており，将来糖尿病，代謝疾患などの生活習慣病の罹患リスクが増大する可能性が危惧される．しかしDOHaD説の分子メカニズムは明らかでない．そこで我々は，DOHaD説に基づく生活習慣病の病態解明とその予防法の開発のための基盤的なデータの収集を行うことを目的とする．
これまでに，我々は妊婦栄養状態がDNAメチル化状態を変化させる可能性を考え，妊婦の血液，臍帯血，胎盤からゲノムDNAを抽出し，11種類の標的遺伝子のDNAメチル化状態と出生体重と妊婦栄養状態との比較・検討を行った．その結果，出生体重とメチル化率に有意な相関関係がある標的遺伝子と相関関係傾向が見られる標的遺伝子をいくつか見出した．
また，検体数40例を用いた予備実験の時に見られた妊娠初期の葉酸濃度と出生体重との有意な相関関係は，検体数130例に増やすことで，相関関係は見られなくなった．そこで，予定していたマイクロアレイを中止し，別の方法として各検体の胎盤におけるいくつかの遺伝子のmRNA量を測定した．その結果，出生体重および胎盤重量と有意な相関関係がある遺伝子をいくつか見出した．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
妊婦の血液，臍帯血，胎盤のゲノムDNAを抽出し，11種類の標的遺伝子のDNAメチル化状態と出生体重と妊婦栄養状態との比較・検討を行った．その結果，出生体重とメチル化率に有意な相関関係がある標的遺伝子と相関関係傾向が見られる標的遺伝子をいくつか見出した．一方で，検体数40例から検体数130例にまで増やすと妊娠初期葉酸濃度と出生体重との相関関係が見られないことから，当初計画していたマイクロアレイを中止し，胎盤を用いて候補遺伝子のmRNA量の測定に変更した．その結果，出生体重および胎盤重量と発現量に有意な相関関係がある遺伝子をいくつか見出したため，当初の予定よりは若干遅れているが，ある程度順調に進行していると評価した．
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| 今後の研究の推進方策 |
研究計画書にそって研究を進めていく予定である．具体的には以下のとおりである．
1) 平成27年度で行った母体の各種栄養状態と母児の組織のDNAメチル化状態との関連性の解析を候補遺伝子を増やしながら継続して行う．
2) 各胎盤からmRNAを抽出し，遺伝子発現と栄養状態や出生体重などと関連性がある遺伝子をリアルタイムPCR法により検索する．
3) 1)の実験より，出生体重，栄養状態等に関連性が見られたプロモーター領域のDNAメチル化が転写制御に影響を与えているのかをメチル化ルシフェラーゼアッセイにより解析する．
4) 胎盤における候補遺伝子のH3K27acやH3K4me3などのヒストン修飾についても解析する．
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| 次年度使用額が生じた理由 |
おおむね計画どおりだったが，少額の未使用金が発生した．
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| 次年度使用額の使用計画 |
物品費として，パイロシークエンスに関連する試薬，メチル化ルシフェラーゼアッセイに必要なプラスミド，ChIPアッセイ用の抗体やその他消耗品を購入する．また，学会発表のための旅費や，研究成果を論文で報告するための論文校閲費などの費用に使用する予定である．
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