研究課題
がん遺伝子の遺伝子増幅は腫瘍の発生、進展、患者の予後に関わり、がん治療にきわめて重要であるものの、がん遺伝子の増幅の制御機構はこれまでよくわかっていない。これまでに遺伝子増幅が原因で抗がん剤に対して耐性をもった複数の細胞について研究を行ってきた。これら細胞に、ある遺伝子を強制発現すると、遺伝子増幅が抑制され、mRNAとタンパク質の発現低下とともに抗癌剤の耐性が低下することを見いだした。この遺伝子が遺伝子増幅を抑制する機構を解析し、DNAのcopy数の変化を伴う変異の発生とその修復機構の全体像を明らかにし、遺伝子増幅を標的とする腫瘍治療の可能性について検討した。テトラサイクリン誘導的に遺伝子増幅抑制因子を発現する細胞を遺伝子増幅がある細胞から単離し、発現誘導時に遺伝子増幅が減少するかを調べたところ、安定発現株と同様に一定の発現期間を経て遺伝子増幅が減少した。この結果からこの因子は遺伝子増幅を減少させることができることが強く示唆された。また、遺伝子増幅が起きている細胞では、すべてではないがこの遺伝子の発現が低下しており、その発現制御について解析したところ、メチル化やプロテアソームによるタンパク質の分解が起こっていることが分かった。この遺伝子を発現させた細胞、もしくは親細胞をNOD-SCIDマウスに移植し、腫瘍形成を調べたところこの遺伝子を発現している細胞を移植したマウスは親細胞を移植したマウスより、腫瘍が1/3であった。今後は、さらなる発現制御機構の解析を行っていくとともに、遺伝子増幅を制御している機構の解析とin vivoでの解析を行っていきたい。
2: おおむね順調に進展している
遺伝子増幅を減少させる因子の減少効果について経時的に調べるために、遺伝子増幅を起こしている細胞でテトラサイクリン誘導的に遺伝子増幅を減少させる遺伝子を発現する細胞を単離した。この細胞を単離するまでに予定していた期間より遅れてしまったが、単離後は予想通りに、一定の発現期間を経て増幅した遺伝子の減少が観察できた。発現制御機構の解析においても、この因子の発現低下機構にメチル化や蛋白質のプロテアソームによる分解経路の亢進が関わっていることを明らかにした。in vivoの解析ではこの因子を強制発現した細胞の腫瘍形成が親細胞の腫瘍形成より著しく抑制されることがわかった。
今後はがん遺伝子の増幅を抑制できるかを幅広く調べるために、データベースを用いて、がん遺伝子の増幅を起こし、かつ遺伝子増幅抑制因子の発現が低下している細胞株を選別し、遺伝子増幅抑制因子を強制発現させ、遺伝子増幅が変化するかを調べていきたい。遺伝子増幅の減少が確認できる遺伝子についてはヌードマウスをもちいて移植実験を行い、腫瘍縮小効果があるかを調べる。また、減少しなかった遺伝子があれば、減少する、しないの違いがどのように起こるのかを調べていきたい。
当初、計画していたテトラサイクリン誘導的遺伝子発現細胞の単離に時間がかかり、遅れが生じた。
分子生物学用実験の試薬を中心に使用し、成果報告のための旅費や論文投稿のための英文校正を計画している。
すべて 2017 2016
すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 2件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (9件)
Oncotarget
巻: 8 ページ: 6353-6363
10.18632/oncotarget.14087.
巻: 7 ページ: 22779-22790
10.18632/oncotarget.8059
