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2017 年度 実績報告書

魚類の多様な繁殖様式を支える配偶子幹細胞の動態解析

研究課題

研究課題/領域番号 15K18567
研究機関筑波大学

研究代表者

林 誠  筑波大学, 生命領域学際研究センター, 助教 (50714838)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワード精原幹細胞 / 魚類 / ニジマス / マーカー遺伝子
研究実績の概要

魚類において、精原幹細胞を識別するための分子マーカーを単離することを目指し、ニジマスを用いて研究を行った。ニジマスにおいて精巣細胞を孵化稚魚腹腔に移植すると、精原幹細胞のみが宿主の生殖腺へと生着し、機能的な精子を継続して作り続けることができる。そこで、宿主生殖腺への生着能を有する精原幹細胞の分子マーカーを同定することを目的として研究を行った。昨年度までに、網羅的遺伝子発現解析およびqPCR法により、この幹細胞マーカーの候補として15種類のトランスクリプトに絞り込んだ。そこで、これら15種類のトランスクリプトについて組織染色によるスクリーニングを行った、これまでの研究から、宿主生殖腺への生着能を有する精原幹細胞は、精巣中の一部の精原細胞であることが明らかになっている。すなわち、精原幹細胞のマーカーは、精巣組織を用いた組織染色において、一部の精原細胞のみを標識することができるトランスクリプトであると考えられる。そこで、作成した抗体による免疫染色、および、in situ hybridization法による組織染色により、精巣組織において一部の精原細胞を標識することができるトランスクリプトの探索を行った。その結果、15種類のうち3種類のトランスクリプトが、精巣組織において一部の精原細胞を標識することが明らかになった。
本研究により、精原幹細胞のマーカー分子として、3種類のトランスクリプトを同定するに至った。これらの知見は、今後、魚類の配偶子幹細胞の研究において基礎となるもであると考えている。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2018 2017

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (2件) (うち国際学会 2件)

  • [雑誌論文] Production of functional sperm by subcutaneous auto-grafting of immature testes in rainbow trout2018

    • 著者名/発表者名
      Hayashi Makoto、Sakuma Daika、Yoshizaki Goro
    • 雑誌名

      Molecular Reproduction and Development

      巻: 85 ページ: 155~162

    • DOI

      10.1002/mrd.22949

    • 査読あり
  • [学会発表] Identification of the molecular markers preferentially expressed in spermatogonial stem cells in fish2017

    • 著者名/発表者名
      Hayashi, M., Iwasaki, Y., Hayashi, T., Ebisawa, M., Sasagawa, Y., Yoshimura, M., Ichida, K., Nikaido, I., Yoshizaki, G.
    • 学会等名
      4th World Congress of Reproductive Biology
    • 国際学会
  • [学会発表] Identification of the molecular markers preferentially expressed in spermatogonial stem cells in fish2017

    • 著者名/発表者名
      Hayashi, M., Iwasaki, Y., Hayashi, T., Ebisawa, M., Sasagawa, Y., Yoshimura, M., Ichida, K., Nikaido, I., Yoshizaki, G.
    • 学会等名
      The International Research Symposium on Regulation of Germ Cell Development in vivo and in vitro
    • 国際学会

URL: 

公開日: 2018-12-17  

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