制御性T細胞のエピジェネティック制御機構の解明と免疫疾患への応用

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K19135
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 中司 寛子 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 特別研究員(PD) (90749334)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 制御性T細胞 / エピジェネティクス / 自己免疫疾患

研究実績の概要

T細胞特異的Tet2/3両欠損マウス(DKO)はT、B細胞の活性化を伴う二次リンパ節腫大を引き起こすことが明らかとなったが、離乳後(3週齢)の抗生物質投与により病態発症を抑えられたことから、腸管での常在細菌によるTCR刺激が引き金となっていることが示唆された。また、TCRを制限したRag2-/-OT-IITgマウスに特異的抗原であるOVAを投与したところ、Tet2/3欠損T細胞はTh17様細胞およびTfh様細胞に分化しやすく、抑制性のTregには分化しにくいことが明らかとなった。
さらに、Treg特異的Tet2/3両欠損マウス(FDKO)を用いてTet2/3欠損Tregの機能解析を行った。炎症性疾患やリンパ球減少性のマウスへのTreg移入実験を行ったところ、Tet2/3欠損Tregは野生型Tregに比してFoxp3の発現を失いやすく、不安定であることが明らかとなった。また、Tet2/3欠損TregはFoxp3の発現を失った後、IL-17を産生するTh17細胞型のexFoxp3細胞になりやすいことがわかった。さらに、炎症性腸疾患モデルマウスを用いてTregの機能解析を行ったところ、野生型Tregは腸炎を抑制したのに対し、Tet2/3欠損Tregは腸炎を抑制できず、Tet2/3はTregの抑制能の発現にも重要であることが明らかとなった。
また、昨年度までに作製したCRISPR/dCas9-Tet発現ベクターをマウスより単離したナイーブT細胞に導入し、安定化iTregの誘導を試みた。その結果、TSDRの部分的脱メチル化には成功したもののFoxp3の発現安定化を誘導することはできなかったため、脱メチル化効率を向上させ、安定化iTregを誘導することを今後の課題としたい。

研究成果

• [雑誌論文] Stabilization of Foxp3 expression by CRISPR-dCas9-based epigenome editing in mouse primary T cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Okada M, Kanamori M, Someya K, Nakatsukasa H and Yoshimura A.
  • 雑誌名: Epigenetics & Chromatin 巻: 印刷中 ページ: -
  • DOI: 10.1186/s13072-017-0129-1
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Notch-mediated conversion of activated T cells into stem cell memory-like T cells for adoptive immunotherapy. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kondo T, Morita R, Okuzono Y, Nakatsukasa H, Sekiya T, Chikuma S, Shichita T, Kanamori M, Kubo M, Koga K, Miyazaki T, Kassai Y, and Yoshimura A.
  • 雑誌名: Nat Commun. 巻: 印刷中 ページ: -
  • DOI: -
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Role of ATP as a Key Signaling Molecule Mediating Radiation-Induced Biological Effects. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kojima S, Ohshima Y, Nakatsukasa H, Tsukimoto M.
  • 雑誌名: Dose Response. 巻: 15 ページ: -
  • DOI: 10.1177/1559325817690638.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Induced Regulatory T Cells: Their Development, Stability, and Applications. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kanamori M, Nakatsukasa H, Okada M, Lu Q, and Yoshimura A.
  • 雑誌名: Trends Immunol. 巻: 37 ページ: 803-811
  • DOI: 10.1016/j.it.2016.08.012.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Roles of transcription factors and epigenetic modifications in differentiation and maintenance of regulatory T cells. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sekiya T, Nakatsukasa H, Lu Q, and Yoshimura A.
  • 雑誌名: Microbes Infect. 巻: 18 ページ: 378-386
  • DOI: 10.1016/j.micinf.2016.02.004.
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] TET2 and TET3 regulate stability and homeostasis of regulatory T cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakatsukasa H and Yoshimura A.
  • 学会等名: 第19回武田科学振興財団生命科学シンポジウム
  • 発表場所: 武田薬品研修所（大阪府吹田市）
  • 年月日: 2017-01-20 – 2017-01-21
  • 国際学会
• [学会発表] TET2 and TET3 regulate Treg stability through Treg-specific DNA demethylation. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakatsukasa H and Yoshimura A.
  • 学会等名: Keystone Symposia on Molecular and Cellular Biology
  • 発表場所: タオス（アメリカ）
  • 年月日: 2017-01-09 – 2017-01-13
  • 国際学会
• [学会発表] TET2 and TET3 play essential roles in Treg-specific DNA demethylation and Treg stability. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nakatsukasa H and Yoshimura A.
  • 学会等名: International Congress of Immunology 2016
  • 発表場所: メルボルン（オーストラリア）
  • 年月日: 2016-08-21 – 2016-08-26
  • 国際学会
• [学会発表] 制御性T細胞のDNA脱メチル化による制御 (2016)
  • 著者名/発表者名: 中司寛子、吉村昭彦
  • 学会等名: 第１回Clinical Immunology/Inflammation Seminar in Shinanomachi
  • 発表場所: 慶應義塾大学（東京都新宿区）
  • 年月日: 2016-07-09
• [図書] 臨床免疫・アレルギー科 (2017)
  • 著者名/発表者名: 中司寛子
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: 科学評論社
• [図書] 実験医学増刊 (2016)
  • 著者名/発表者名: 吉村昭彦、岡田匡央、金森光広、中司寛子
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: 羊土社
• [図書] 臨床免疫・アレルギー科 (2016)
  • 著者名/発表者名: 中司寛子、金森光広、岡田匡央、吉村昭彦
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: 科学評論社